PCV2感染仔豬急性期蛋白的變化.pdf

1、本文通過(guò)仔豬試驗(yàn)性感染PCV2，動(dòng)態(tài)測(cè)定血清中急性期蛋白濃度和肝臟急性期蛋白表達(dá)的變化，并觀察了調(diào)控這些蛋白的2條主要通路：IL-1R-NF-kB和IL-6R-NF-kB的變化，為PCV2相關(guān)疾病的發(fā)生機(jī)理和臨床診斷提供依據(jù)。
　　 19頭ELISA檢測(cè)PCV2、PRRSV抗體陰性的5周齡健康斷奶仔豬，隨機(jī)分為對(duì)照組4頭和攻毒組15頭。仔豬在攻毒后3、7、10、14、21、28和35 d采集血液，并在14、21和35 d分別剖殺

2、5頭。用ELISA方法檢測(cè)C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）、結(jié)合珠蛋白（Haptoglobin，HP）、血清淀粉樣蛋白A（Serum Amyloid A，SAA）、α1-酸性糖蛋白（alpha-1 Acid Glycoprotein，AGP）、豬主要急性期蛋白（Pig-Main AcutePhase protein，Pig-MAP）和載脂蛋白-A I（Apolipoprotein-A I，Apo-A I）的動(dòng)

3、態(tài)變化。同時(shí)測(cè)定肝臟中APPs mRNA和IL-1R、IL-6R mRNA表達(dá)的變化；用激光共聚焦顯微鏡對(duì)NF-κB的表達(dá)和入核情況進(jìn)行間接免疫熒光法檢測(cè)。
　　 結(jié)果顯示，仔豬接種PCV2后出現(xiàn)嗜睡，生長(zhǎng)遲緩，消瘦，呼吸急促體溫上升等臨床癥狀。鏡檢肝臟的主要組織病理學(xué)變化是：低倍鏡下，肝小葉結(jié)構(gòu)明顯，小葉間結(jié)締組織增生，肝細(xì)胞索排列紊亂，肝細(xì)胞腫大，呈明顯水泡變性，增生的結(jié)締組織和實(shí)質(zhì)中，可見(jiàn)多量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；高倍鏡下，肝細(xì)胞

4、腫大，呈明顯空泡化，肝實(shí)質(zhì)中浸潤(rùn)有多量嗜酸性粒細(xì)胞，增生的結(jié)締組織中見(jiàn)有多量嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，攻毒后21 d肝臟損傷最明顯，除上述各種病變外，尚出現(xiàn)明顯的壞死灶。
　　 仔豬接種PCV2后，不同APPs具有不同的變化，多數(shù)在攻毒后14～21 d有升高的趨勢(shì)。血清Pig-MAP在攻毒后7 d達(dá)到峰值，在7和10 d顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；血清SAA的變化在攻毒后7 d和21 d顯著高于對(duì)照組（P<0.05）；血清Apo-A

5、 I攻毒后21 d顯著高于對(duì)照組（P<0.05），其余時(shí)間差異均不顯著；血清AGP在攻毒后10 d和35 d顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；血清HP含量的變化，在攻毒后早期（0～10 d）變化不明顯，除攻毒后14和28 d血清HP含量顯著低于對(duì)照組（P<0.05）外，其余時(shí)間差異均不顯著（P>0.05）；血清CRP的含量變化不明顯.
　　 PCV2感染仔豬肝臟各種APP mRNA的表達(dá)呈現(xiàn)不同的變化。IL-1R mRNA表達(dá)和Ⅰ

6、類APPs（CRP，SAA和AGP）mRNA的表達(dá)呈明顯正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別達(dá)到：0.65，0.83和0.78；IL-6R mRNA與Ⅱ類APPs（HP和pig-MAP）mRNA之間無(wú)明顯相關(guān)；PCV2攻毒后NF-kB的表達(dá)和入核率在14和21 d升高。結(jié)果證實(shí)，PCV2可以通過(guò)IL-1R-NF-κB信號(hào)系統(tǒng)調(diào)控Ⅰ類APPs mRNA的表達(dá)，而Ⅱ類APPs mRNA的表達(dá)機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
　　 以上結(jié)果表明：（1）仔豬在接種

7、PCV2后，出現(xiàn)了以肝細(xì)胞變性，小葉間結(jié)締組織增生和嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為特征的病理學(xué)損傷。（2）PCV2攻毒后，各種APP變化規(guī)律不同，CRP的變化與肝臟的病理?yè)p傷有關(guān)；Pig-MAP可以作為病程發(fā)展的重要檢測(cè)指標(biāo)，對(duì)監(jiān)測(cè)PCV2感染、疾病的預(yù)后起重要作用；HP可以反應(yīng)肝臟自由基損傷程度；兩種具有載脂功能的蛋白SAA和Apo-A I在攻毒期間起到互補(bǔ)的作用，以維持肝臟脂類代謝。（3）PCV2可以通過(guò)過(guò)IL-1-IL-1R-NF-κB信號(hào)系