術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的早期病原診斷及美羅培南治療方案優(yōu)化研究.pdf

1、術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的早期病原診斷及美羅培南治療方案優(yōu)化研究StudyontheetiologiegenetiediagnosisofeentralnervoussysteminfeetionsandoPtimizationofmeroPenemtreatment指導(dǎo)小組成員導(dǎo)師:吳菊芳教授成員:張著主任技師李光輝副教授林東防副主任醫(yī)師者:張宇一校:復(fù)旦大學(xué)系:華山醫(yī)院業(yè):內(nèi)科學(xué)(傳染病學(xué))作學(xué)院專本研究受以下課題資助:華山醫(yī)院抗生素研

2、究所張嬰元教授“衛(wèi)生部部屬(管)醫(yī)院臨床學(xué)科重點(diǎn)項(xiàng)目”。術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的早期病原診斷及美羅培南治療方案優(yōu)化研究摘要第一部分中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染病原快速基因診斷研究目的:評(píng)價(jià)病原快速基因檢測(cè)方法在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染中的可靠性與實(shí)用性，明確其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法:按入選排除標(biāo)準(zhǔn)收集神經(jīng)外科術(shù)后擬診為中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者的腦脊液，通過PCR擴(kuò)增及基因芯片雜交技術(shù)檢測(cè)病原菌種類，并與常規(guī)腦脊液培養(yǎng)的結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果:共收集腦脊液標(biāo)本204例，其

3、中常規(guī)方法培養(yǎng)陽性者29例，基因芯片方法檢測(cè)陽性者為25例?；蛟\斷方法與常規(guī)方法比較，符合率98.03%(200204)，敏感度為86.21%，特異度為100%。如排除因基因芯片未設(shè)置探針而檢測(cè)陰性的3例標(biāo)本，則符合率為99.50%(200201)，敏感度為96.巧%?；蛟\斷較常規(guī)培養(yǎng)方法在病原菌的診斷時(shí)間上縮短3.24士1.22天如就腦脊液細(xì)菌陽性病例而言，檢出時(shí)間縮短2.44士0.68天二者均有顯著差異(P0.01)。結(jié)論:病原

4、快速基因檢測(cè)方法與常規(guī)培養(yǎng)方法比較，符合率高、檢測(cè)時(shí)間明顯縮短，方法可靠，具有臨床應(yīng)用價(jià)值。第二部分人血漿及腦脊液中美羅培南濃度的HPLC測(cè)定方法研究目的:建立人血漿及腦脊液樣品中美羅培南的定量測(cè)定方法。方法:采用高效液相色譜法，TSK一gezoDs一SOTMe，8柱(zsommx4.6mm，spm)，血漿樣品測(cè)定流動(dòng)相為15mjnol.L一，KHZPO4(pH3.2)一乙睛(87:13)，腦脊液樣品測(cè)定流動(dòng)相為IOmlnolL一‘乙酸

5、胺(PH3.86)一乙睛(90:10)，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)均為3O8nm。結(jié)果:血漿樣品中美羅培南保留時(shí)間為3.148分鐘，在0.smgL一‘一100mgL一‘血藥濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9999)，最低檢測(cè)濃度為0.smgL一‘各質(zhì)控濃度提取回收率平均為109.lq0，日內(nèi)、日間RSD均100k，方法回收率為82.6%一96.6%一80℃冰箱保存6月內(nèi)回收率穩(wěn)定。腦脊液樣品中美羅培南保留時(shí)間為3.810分鐘，在0.25mgL一‘一S