番茄黃化曲葉病毒江蘇分離物侵染性克隆的構(gòu)建及其在品種抗性鑒定上的應(yīng)用.pdf

1、本文通過對江蘇省部分番茄上的雙生病毒的病害調(diào)查、取樣，并對樣品分離物的部分序列進(jìn)行測定，序列分析結(jié)果顯示該病毒分離物屬于粉虱傳雙生病毒（whitefly transmitted geminiviruses，WTGs），與番茄黃化曲葉病毒（tomatoyellowleaf curl virus，TYLCV）的同源性高達(dá)99％。其中在南京、常州、泰州、連云港、徐州、鹽城、蘇州等地區(qū)均發(fā)現(xiàn)有該病害的危害。
　　 通過對興化地區(qū)病毒分離

2、物DNA-A全序列的克隆及測序，BLAST分析表明該病毒屬于番茄黃化曲葉病毒。分子檢測發(fā)現(xiàn)該病毒體內(nèi)沒有DNAβ衛(wèi)星分子，只有DNA-A組分。為明確江蘇省番茄黃化曲葉病毒DNA-A的侵染性，通過對其DNA-A組分進(jìn)行侵染性克隆的構(gòu)建及侵染性驗(yàn)證。結(jié)果表明：該病毒的DNA-A組分能夠單獨(dú)侵染寄主植物并誘發(fā)感病癥狀；這說明侵染江蘇省番茄黃化曲葉病的病原是番茄黃化曲葉病毒。
　　 把構(gòu)建好的侵染性克隆轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，用農(nóng)桿菌注射接種法對9

3、個(gè)番茄品種TYLCV的抗性進(jìn)行篩選、鑒定，同時(shí)用室內(nèi)煙粉虱接種作比較。鑒定結(jié)果表明：煙粉虱接種同農(nóng)桿菌接種發(fā)病程度基本一致；并從這9個(gè)品種中篩選到2個(gè)抗性較好的品種，為選育抗性品種提供了親本材料。
　　 將構(gòu)建的侵染性克隆用于農(nóng)桿菌注射接種來篩選抗TYLCV的番茄品種的方法在國內(nèi)尚未報(bào)道過，與煙粉虱接種相比，農(nóng)桿菌注射接種能夠控制病毒接種量及接種時(shí)期，其鑒定結(jié)果更穩(wěn)定、可靠.該方法的成功應(yīng)用將為今后育種工作中篩選番茄對TYLCV