番茄黃化曲葉病毒病的防治效果及相關(guān)抗性基因的表達(dá)特征分析.pdf

1、番茄黃化曲葉病毒病(Tomatoyellow leaf curl virus disease，TYLCVD)是危害番茄(Lycopersicon esculentum Mill)生產(chǎn)的一種病毒病。目前，該病已經(jīng)成為制約江蘇省番茄生產(chǎn)的主要病害之一。TYLCVD由雙生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花葉病毒屬(Begomovirus)番茄黃化曲葉病毒(Tomatoyellow leaf curl virus，TYLCV)引起，

2、該病毒在煙粉虱和番茄植株內(nèi)雙向存活，自然條件下只能由煙粉虱傳播。研究報(bào)道煙粉虱種群數(shù)量的劇增，隨即TYLCVD會大面積暴發(fā)。而煙粉虱寄主范圍十分廣泛，給該病害的防治帶來很大難度。
　　 本研究從三方面開展實(shí)驗(yàn)。一是從控制煙粉虱的種群數(shù)量角度，研究了設(shè)置防蟲網(wǎng)、鋪設(shè)地膜、間作黃瓜等措施對控制煙粉虱的種群數(shù)量和防控TYLCVD的效果。二是研究了煙粉虱對五種不同類型藥劑的敏感性，檢測施藥后煙粉虱體內(nèi)抗藥相關(guān)基因CYP6CM1和Coe1

3、的表達(dá)情況，為合理用藥和煙粉虱抗性治理提供理論基礎(chǔ)。三是研究番茄抗病相關(guān)基因LeHT1、Permease的表達(dá)特征與抗病的相關(guān)性，為篩選抗性基因進(jìn)行輔助育種工作奠定基礎(chǔ)。研究結(jié)果如下:
　　 1.設(shè)置防蟲網(wǎng)較無防蟲網(wǎng)煙粉虱種群數(shù)量少38.22％。鋪設(shè)黑白、銀黑地膜對煙粉虱種群數(shù)量和病害的發(fā)生有較好防控效果，黑白地膜、銀黑地膜較黑色地膜煙粉虱分別少72.57％，50.59％。設(shè)置防蟲網(wǎng)與黑白地膜處理TYLCVD發(fā)病率較無防蟲網(wǎng)設(shè)置

4、組低35.49％。間種黃瓜對煙粉虱的種群數(shù)量無顯著影響，但可減少病害發(fā)生，間作黃瓜處理下黑白地膜發(fā)病率僅為7.05％，黑色地膜發(fā)病率達(dá)17.64％。影響TYLCVD發(fā)病的因素的主次順序依次為:防蟲網(wǎng)、地膜、間作黃瓜。優(yōu)組合為:設(shè)置防蟲網(wǎng)、鋪設(shè)黑白地膜、間種黃瓜。覆蓋紫外吸收膜較覆蓋普通PVC膜煙粉虱種群數(shù)量少37.64％，紫外吸收膜處理鋪設(shè)銀黑地膜田塊發(fā)病率最低，僅為9.85％。黃板監(jiān)測統(tǒng)計(jì)的煙粉虱種群數(shù)量變化顯示，掛置2-9d誘集煙粉

5、虱種群數(shù)量增幅最大，誘集煙粉虱成蟲數(shù)量由少至多依次為，黑白地膜、銀黑地膜、透明地膜、無地膜、黑色地膜。
　　 2.藥劑處理72h后煙粉虱成蟲校正死亡率由高到低分別為:4％阿維菌素，98.01％;70％艾美樂，80.91％;5％銳勁特，61.15％;2.5％高效氯氟氰菊酯，40.73％;25％噻嗪酮，低于5％。Semi-quantitive PCR檢測發(fā)現(xiàn)70％艾美樂處理后，煙粉虱CYP6CM1基因表達(dá)量顯著升高，Coe1基因表達(dá)

6、量與藥劑處理前無明顯差異。4％阿維菌素處理后，CYP6CM1基因表達(dá)量顯著下降，Coe1基因表達(dá)量與藥劑處理前無明顯差異。2.5％高氯氟氰菊酯處理后CYP6CM1基因表達(dá)量表達(dá)量變化不大，Coe1基因表達(dá)量稍有增加。25％噻嗪酮處理后CYP6CM1基因稍有增加，Coe1基因表達(dá)量略有下降。由于不同劑型的靶標(biāo)基因不同，該CYP6CM1、Coe1可能參與抗藥性，也可能是煙粉虱成蟲的一種應(yīng)急反應(yīng)，有待于進(jìn)一步研究。
　　 3.感性材料

7、S與抗性材料TY-2（含Ty-2抗病基因）在接種第2d便檢測到病毒，抗性材料TY-1和TY-3（分別含Ty-1，Ty-3抗病基因）分別在接種后3d、15d檢測出病毒條帶。S和TY-1分別在接種后7d、20d有明顯的發(fā)病癥狀;TY-2和TY-3整個(gè)生育期均無發(fā)病癥狀。接種后，LeHT1表達(dá)量在S中0d處理時(shí)無表達(dá)，隨接種時(shí)間增加呈現(xiàn)表達(dá)量先上升后下降趨勢;在TY-2、TY-3中LeHT10d時(shí)表達(dá)量高，隨接種時(shí)間增加呈下降趨勢，TY-1在