龍眼殼多糖的提取、分離純化與性質(zhì)研究.pdf

1、龍眼是藥食兼用的植物資源，具有極高的食用和藥用價值。龍眼果實含有14％～22％的殼，目前對龍眼殼開發(fā)研究程度較低。本論文選用40℃條件下烘干的新鮮龍眼殼為原料，以龍眼殼多糖為目標(biāo)產(chǎn)物，探討了熱水浸提、微波和超聲波輔助提取多糖的工藝條件，確立了龍眼殼多糖的最佳提取方法及工藝參數(shù)；對提取得到的粗多糖進(jìn)行脫蛋白、脫色、DEAE-52纖維素柱層析和Sephadex—G200凝膠柱層析等分離純化研究；并龍眼殼多糖的理化性質(zhì)進(jìn)行了初步研究。論文研究

2、旨在為龍眼殼的綜合開發(fā)和龍眼殼多糖的功能性研究提供基礎(chǔ)理論依據(jù)，主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下： (1)采用蒽酮—硫酸法測定龍眼殼多糖含量，該法具有操作簡便、精密度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、回收率高等特點，所得數(shù)據(jù)精確。 (2)以龍眼殼為原料，比較了熱水浸提、微波和超聲波輔助提取龍眼殼多糖的工藝條件，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面分析法對龍眼殼多糖的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。試驗得出熱水浸提法最佳工藝參數(shù)為：浸提溫度59℃，時間3h，水料比35：

3、1，多糖得率1.29％：微波輔助提取最佳工藝參數(shù)為：微波溫度為68℃，水料比為35：1條件下提取4.7min，多糖得率高達(dá)1.98％；超聲波輔助提取最佳工藝參數(shù)為：水料比為26：1，超聲波功率100W，在57℃下提取10.5min，多糖得率為1.42％；三種提取方法相比較，微波輔助提取在龍眼殼多糖得率和提取效率方面具有明顯優(yōu)勢。 (3)比較Sevag法、三氯乙酸法、生物酶法對龍眼殼粗多糖中蛋白質(zhì)的脫除效果，試驗結(jié)果表明，采用生物

4、酶法效果最好。經(jīng)木瓜蛋白酶酶解后，蛋白質(zhì)脫除率達(dá)80％，多糖損失率為27％。 (4)比較5種樹脂靜態(tài)吸附、雙氧水法和活性碳法的脫色效果，以樹脂D900脫色效果最好。通過單因素試驗研究了溫度、吸附時間、pH值、樹脂添加量四個因素對脫色效果的影響，采用正交試驗確定了龍眼殼多糖最佳脫色工藝條件為：溫度40℃，吸附時間2h，pH值4.5，樹脂添加量7.5g，經(jīng)驗證試驗得出，在此條件下，龍眼殼多糖的脫色率為84.1％，多糖保留率為64.2

5、％。 (5)經(jīng)脫蛋白、脫色、去除小分子雜質(zhì)后得到龍眼殼粗多糖LP-1，經(jīng)DEAE-52纖維柱層析分離，以蒸餾水洗脫效果最好，以0.1mol/L、0.3 mol/L、0.5 mol/L NaCl溶液洗脫峰型對稱性差，出峰面積小，含糖量低。故試驗中收集以蒸餾水洗脫的第8～18管洗脫液，濃縮醇沉后得龍眼殼多糖LP-2。 (6)將DEAE-52柱層析分離所得的LP-2經(jīng)Sephadex G-200凝膠柱層析，得到一純度較高的均一