蚜蟲病原真菌努利蟲癘霉菌絲劑型研制及其流行潛能研究.pdf

1、蟲霉目中有30余種侵染蚜蟲的寄主專化性和非?；圆≡婢?，是蚜蟲生物防治的重要資源。本研究較系統(tǒng)地研究了蚜科?；呐x癘霉(Panodra nouryi)，重點(diǎn)揭示其休眠孢子形成機(jī)制和野外流行潛能，并研制出黍米凝膠和黍米海藻酸鹽兩種顆粒劑。主要結(jié)果如下：
　　 努利蟲癘霉休眠孢子的形成機(jī)制努利蟲癘霉是侵染蚜蟲的蟲癘霉中唯一可產(chǎn)休眠孢子的病原真菌，有利于在寄主匱乏季節(jié)的宿存。為揭示休眠孢子在寄主體內(nèi)形成的機(jī)制，將飼養(yǎng)于甘藍(lán)葉圓片

2、上的桃蚜(Myzus persicae)若蚜群(40-60頭/葉)接種努利蟲癘霉初級(jí)分生孢子，接種濃度（C）從數(shù)個(gè)到接近2000個(gè)孢子/mm2，并在10,-～25℃（T)和8-16h日光照（HL）組合條件或自然溫光條件(17.5±3.1℃，13L:llD)下飼養(yǎng)，每個(gè)溫光處理包含36--83個(gè)不同接種劑量的蚜群，并在7-11天飼養(yǎng)期內(nèi)觀察各蚜群的死亡率和產(chǎn)休眠孢子的蚜尸比例。結(jié)果表明，各溫光處理的蚜蟲死亡率與接種劑量均呈現(xiàn)典型的S形變化

3、趨勢(shì)，并擬合邏輯斯蒂方程（0.79≤r2≤0.88），半致死濃度(劑量)LCso值(1.7-6.1個(gè)孢子/mm2)在各處理間不存在顯著差異。蚜群中產(chǎn)休眠孢子的蚜尸比例(P)與接種劑量C之間的關(guān)系同樣擬合邏輯斯蒂方程(0.73≤r2≤0.85)，僅10℃處理例外。在溫度10～25℃和8-16 h日光照范圍內(nèi)，P-C關(guān)系可擬合復(fù)合邏輯斯蒂方程P=0.578/{1+exp[1.710-(0.136-0.0053T)C])(r2=0.79)和P

4、=0.534/{l+exp[1.639+(0.034-O.0053He)C]）(r2=0.79)，顯示形成休眠孢子的蚜尸比例依賴于侵染性分生孢子的密度，且這一關(guān)系受環(huán)境溫度和光周期調(diào)節(jié)，在給定分生孢子密度下，適溫區(qū)內(nèi)溫度越低和日光照越長(zhǎng)，越易形成休眠孢子。多變量線性相關(guān)分析表明，努利蟲癘霉在寄主體內(nèi)的休眠孢子形成，主要受接種體密度（劑量）的影響，環(huán)境因素中溫度的影響大于光周期，后者的影響表現(xiàn)在同溫度的互作效應(yīng)。
　　 努利蟲癘霉

5、黍米凝膠顆粒培養(yǎng)物的產(chǎn)孢、貯存和毒力努利蟲癘霉是嚴(yán)格的蚜蟲?；≡婢?，體外培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)條件苛刻，其分生孢子彈射需要飽和空氣濕度。用不同比例的黍米粉(80,-05％)與3種高分子吸水凝膠粉（聚丙烯酰胺、聚丙烯酸和丙烯酰胺．丙烯酸共聚物）按5～20％的比例混合而成12種配方，分別壓制成長(zhǎng)2～5 mm、直徑0.8mm的顆粒(3-4 mg/cm)作為努利蟲癘霉的固體培養(yǎng)基質(zhì)。在優(yōu)化的培養(yǎng)條件下，每種顆粒接種新鮮液培菌絲(30 mg/g)，再加無(wú)

6、菌水使顆粒的含水量維持在87.5％左右，充分混勻后在20℃下靜置培養(yǎng)4～12天。努利蟲癘霉在所有配方顆粒上均生長(zhǎng)良好，尤以含10％共聚物的顆粒最佳，經(jīng)8天培養(yǎng)后可在100％ RH下連續(xù)產(chǎn)孢6天，產(chǎn)孢總量高達(dá)58.5x104個(gè)孢子/mg，6天內(nèi)的產(chǎn)孢分布依次為31.1％、30.6％、15.8％、10.3％、7.9％和4.3％，而同樣條件下蚜尸的產(chǎn)孢量?jī)H為4.2x104個(gè)孢子/頭。這一優(yōu)化配方的培養(yǎng)物顆粒在86～97％的非飽和空氣濕度中也能

7、彈射分生孢子并形成典型的孢子暈。在6"C下黑暗貯存，含水量>85％的顆粒培養(yǎng)物的貯存時(shí)間(120天)是室溫下的2倍，比相同溫度但含水量降低條件下貯存的培養(yǎng)物延長(zhǎng)產(chǎn)孢能力40天，但產(chǎn)孢潛能的半衰期相近(34～39天)。冷貯70天的顆粒培養(yǎng)物彈射的分生孢子，其侵染力不及新鮮的培養(yǎng)物，接種后第4～6天對(duì)桃蚜若蚜的LCso高于新鮮培養(yǎng)物顆粒(3.6、2.6和2.3個(gè)孢子/mm2)。這種新型的黍米凝膠顆粒不僅適宜努利蟲癘霉的固體培養(yǎng)，而且可降低其

8、產(chǎn)孢的濕度要求，是蟲霉制劑技術(shù)的顯著進(jìn)步。
　　 努利蟲癘霉的田間流行潛力有關(guān)努利蟲癘霉流行規(guī)律的認(rèn)識(shí)遠(yuǎn)不如廣為人知的新蚜蟲癘霉(P.neoaphidis)。將努利蟲癘霉的液培菌絲嵌入含黍米粉的海藻酸鹽均勻珠狀顆粒之中，20℃下單粒產(chǎn)孢量高達(dá)28.4×104個(gè)孢子，是不含黍米粉的相同顆粒產(chǎn)孢量的9.5倍。在4～28℃下，黍米海藻酸鹽顆粒的單粒產(chǎn)孢量是單頭蚜尸的3.6～13.6倍，產(chǎn)孢持續(xù)時(shí)間是蚜尸的1.8～2.7倍，不管干燥與否

9、均可在6℃下貯存120天。將此顆粒劑作為接種體釋放到田間網(wǎng)籠（4m2/籠）內(nèi)的先前均勻轉(zhuǎn)接桃蚜的甘藍(lán)植株(等距60 cm)上，誘發(fā)定殖桃蚜種群的流行病。在從秋至春歷時(shí)4個(gè)月的田間試驗(yàn)中，按每株5-20粒釋放黍米海藻酸鹽顆粒劑后連續(xù)觀察18周，努利蟲癘霉在蚜群中成功定殖并誘發(fā)蚜蟲死亡，但其流行始終維持在低水平（1％左右）徘徊。入春隨溫度上升和陰雨日增多，蚜蟲發(fā)病死亡率略有提高，4號(hào)籠最高達(dá)到13％，5號(hào)籠8.6％，3號(hào)籠3％和2號(hào)籠1.3