同翅目昆蟲專性病原真菌飛虱蟲癘霉的固體培養(yǎng)法及其蟲尸模擬培養(yǎng)物的生物學(xué)特性與功能.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文同翅目昆蟲專性病原真菌飛虱蟲癘霉的固體培養(yǎng)法及其蟲尸模擬培養(yǎng)物的生物學(xué)特性與功能姓名：梁勇申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生態(tài)學(xué)指導(dǎo)教師：馮明光20030701中文摘要飛虱蟲癘霉(Pandoradelphacis(Hori)Humber)是同翅目昆蟲的專性昆蟲病原真菌，分類上屬于接合菌Ⅳf3(Zygomyeotina)的蟲霉目(Entomophthorales)，常引發(fā)飛虱、葉蟬的流行病，也侵染蚜蟲、沫蟬等寄主。侵染體的高效

2、低成本繁殖長期困擾蟲霉的基礎(chǔ)與應(yīng)用研究。針對這一普遍性的技術(shù)難題，本研究以飛虱蟲癘霉F95129菌株為對象，以黍米、粟米為基本材料，探索建立簡便易行的侵染體繁殖技術(shù)體系，并對培養(yǎng)物進(jìn)行了產(chǎn)孢潛能及其影響因子的評價(jià)以及針對桃蚜(Myzuspersicae(Sulzer))ff々侵染性測定和時(shí)間一劑量一死亡率模型模擬。主要研究內(nèi)容和結(jié)果分述如下：固體培養(yǎng)篩選確定了以黍米(PanicummiliaceumL，俗稱黃米)和粟米(Setariai

3、talicaL，俗稱小米)為最適固體培養(yǎng)基質(zhì)，對飛虱蟲癘霉進(jìn)行了成功的繁殖試驗(yàn)。將菌絲生物量約為25medml的菌絲液按20％的比例(v／w)接入經(jīng)高溫濕熱滅菌并適度熟化、含水量分別為45％和42％的黍米及粟米中。在25℃和12L：12D條件下直接培養(yǎng)，所獲3～17d黍米和粟米培養(yǎng)物的產(chǎn)孢潛能和有效產(chǎn)孢時(shí)間因培養(yǎng)天數(shù)不同而異。采用自行設(shè)計(jì)的采孢裝置和精確定量測定方法，黍米培養(yǎng)物以培養(yǎng)5d的產(chǎn)孢量最大，達(dá)1711_3x104個(gè)孢子，粒，培

4、養(yǎng)7～11d的黍米產(chǎn)孢量為13o~139x104個(gè)孢子／粒。粟米培養(yǎng)物以培養(yǎng)7d的產(chǎn)孢量最大，達(dá)109：tO62x104個(gè)孢子／粒，培養(yǎng)3～5d和9～lld的產(chǎn)孢量為85～107x104個(gè)孢予／粒。相對于新鮮蚜尸2303x104個(gè)孢子／頭的平均產(chǎn)孢量和≤60h的有效產(chǎn)孢時(shí)間，5～11d黍米培養(yǎng)物的產(chǎn)孢潛能高出56～74倍，3～11d的粟米培養(yǎng)物的產(chǎn)孢潛能則高出37~468倍，有效產(chǎn)孢時(shí)間均延長l倍以上。在培養(yǎng)物侵染性的定性測定中，黍米培

5、養(yǎng)物接種7d內(nèi)導(dǎo)致桃蚜感病死亡698％，粟米培養(yǎng)物引起感病死亡687％。結(jié)果表明，飛虱蟲癘霉黍米和粟米培養(yǎng)物的生物學(xué)性狀類似于該菌侵染致死的蚜尸，故單顆米粒培養(yǎng)物相當(dāng)于天然蟲尸的模擬物，但單顆米粒的產(chǎn)孢潛能和有效產(chǎn)孢時(shí)間遠(yuǎn)優(yōu)于單頭天然蚜尸。由此首次建立了利用谷物直接培養(yǎng)蟲癘霉而制各人工模擬蟲尸的技術(shù)體系和評價(jià)方法。黍米培養(yǎng)物的侵染性及毒力用飛虱蟲癘霉黍米培養(yǎng)物作為侵染體源對桃蚜2～3齡若蚜進(jìn)行了9個(gè)序列孢子劑量(O4～501個(gè)孢子／mm