桑樹組培快速繁育、脫毒及原生質(zhì)體分離技術(shù)的研究.pdf

1、植物組織培養(yǎng)一般可用于植物的快速繁殖、脫毒、育種及種質(zhì)資源的保存、次生代謝產(chǎn)物生產(chǎn)和基礎(chǔ)理論研究等。目前，已經(jīng)利用不同的桑樹外植體建立了多種離體培養(yǎng)體系。
　　 每個(gè)細(xì)胞的原生質(zhì)體都含有該個(gè)體的全部遺傳信息，在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下具有再生成與其親本相似個(gè)體的全能性，在同一時(shí)間內(nèi)獲得的大量原生質(zhì)體在遺傳上是同質(zhì)的。近年來，植物原生質(zhì)體的研究越來越受到重視，研究重點(diǎn)己從原生質(zhì)體的分離、原生質(zhì)體的生理生化特性和原生質(zhì)體再生植株的獲得，轉(zhuǎn)移

2、到原生質(zhì)體的應(yīng)用方面。
　　 本研究以農(nóng)桑14號(hào)冬芽為外植體，以MS、B5、N6、WPM為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度的細(xì)胞分裂素（6-BA）、激動(dòng)素（KT）和生長素（2，4-D）和萘乙酸（NAA）等，培養(yǎng)基中添加蔗糖3％，瓊脂0.8％，pH值為5.8，研究了桑樹無菌體系的建立，不同培養(yǎng)基組分和激素濃度對(duì)桑組培苗生長的影響，篩選出了最適的啟動(dòng)、分化、生根培養(yǎng)基。結(jié)果表明：桑樹離體培養(yǎng)采用不同的消毒劑聯(lián)合使用消毒效果最好；基礎(chǔ)培養(yǎng)基采

3、用MS培養(yǎng)基；添加6-BA和2，4-D時(shí)，組培苗生長高度最大為4.1 cm，最適合于桑組培苗生長；最適的啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5 mg/L+2，4-D0.1 mg/L，分化培養(yǎng)基為MS+6.BA2.0 mg/L+2，4-D0.1 mg/L；生根培養(yǎng)基為MS+NAA0.1 mg/L。
　　 通過對(duì)農(nóng)桑14號(hào)組培苗二次莖尖脫毒試驗(yàn)可知：對(duì)桑樹莖尖脫毒培養(yǎng)時(shí)，39℃熱處理15 d，脫毒植株平均高度達(dá)到最大值為3.8 cm；莖尖

4、大小為0.5mm時(shí)脫毒植株平均高度最大為2.1 cm；光照有利于誘導(dǎo)桑組培苗莖尖萌發(fā)、生長、分化；活性炭有利于提高脫毒培養(yǎng)莖尖的轉(zhuǎn)綠率、分化率，且莖尖發(fā)育程度高；脫毒苗生長的最優(yōu)培養(yǎng)基為MS+6-BA2.0
　　 mg/L+NAA0.2 mg/L；二次莖尖脫毒比一次脫毒能提高脫毒率6.67％。
　　 通過對(duì)桑樹原生質(zhì)體分離試驗(yàn)得知：黑暗處理24 h可使原生質(zhì)體活力提高5％；低溫處理72h可使原生質(zhì)活力提高6％；原生質(zhì)體分