棗愈傷組織誘導(dǎo)和原生質(zhì)體分離研究.pdf

1、本試驗(yàn)以冬棗組培苗葉片、嫩莖和冬棗黃蕾期的花藥為材料研究了各材料誘導(dǎo)愈傷組織的條件并以冬棗組培苗葉片、酸棗四倍體組培苗葉片和冬棗花藥愈傷組織細(xì)胞懸浮系為材料，找出了適合各材料分離原生質(zhì)體的纖維素酶和離析酶的濃度、甘露醇濃度、分離時(shí)間、離心速度。 1.冬棗組培苗葉片不適合用于誘導(dǎo)愈傷組織。適合冬棗組培苗嫩莖誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基為：1/2MS+ZT3.0mg/L+NAA10.0mg/L或1/2MS+ZT0.5mg/L+NAA2.0m

2、g/L，愈傷組織狀態(tài)理想。適合冬棗花藥愈傷組織誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為1/2MS+TDZ0.4mg/L+PVP2.0mg/L。 2.冬棗花藥愈組織細(xì)胞懸浮系的增殖培養(yǎng)基為1/2MS+TDZ0.4，并且在繼代后7～9天進(jìn)行原生質(zhì)體的分離。時(shí)間太短愈傷增殖速度慢，形成的新生愈傷組織少；超過10天，愈傷組織的顏色逐漸變褐，生命力降低，不適合分離原生質(zhì)體。 3.冬棗花藥愈傷組織的繼代培養(yǎng)基為1/2MS+TDZ0.4mg/L，愈傷組織生長(zhǎng)速

3、度快，增殖量大，并能夠在繼代兩年后仍保持旺盛的再生能力。 4.冬棗組培苗葉片、花藥愈傷組織細(xì)胞懸浮系都是分離原生質(zhì)體的良好材料，適宜冬棗組培苗葉片分離原生質(zhì)體的酶液組成為0.7mol/L甘露醇+1﹪MES+5g/L纖維素酶。 5.適合四倍體酸棗組培苗葉片分離原生質(zhì)體的酶液組成為0.6mol/L甘露醇+1﹪MES+10g/L纖維素酶+4～5g/L離析酶。 6.適宜花藥愈傷組織細(xì)胞懸浮系分離原生質(zhì)體的酶液組成為0.6