BoLA--A在妊娠奶牛和新生牛中的差異表達研究.pdf

1、近年來,隨著人們生活水平的不斷提高,人們對奶制品,特別是牛奶制品的需求日益增加。奶牛是奶產(chǎn)品最為重要的載體,但是其妊娠和分娩,以及新生犢牛的存活率不高,是現(xiàn)代奶牛飼養(yǎng)過程中最突出的問題。在不斷通過改善飼養(yǎng)環(huán)境和提升飼料品質(zhì)的同時,人們開始從分子的角度來研究如何提高奶牛生產(chǎn)性能和提高新生仔牛的優(yōu)良率。奶牛的妊娠和分娩過程屬于典型的同種半異體免疫過程,主要組織相容性復(fù)合體(MHC)的主要作用就是對抗原的識別和應(yīng)答。所以妊娠和分娩必然受到MH

2、C的調(diào)控。
　　牛的MHC被命名為牛白細胞抗原(bovine leukocyte antigen, BoLA),其基因是高度多態(tài)、緊密連鎖的一個家族。目前對于BoLA的功能研究表明,BoLA幾乎分布在所有細胞表面,是一類轉(zhuǎn)膜蛋白,在抗原的識別和信號遞呈傳導(dǎo)、免疫應(yīng)答及其調(diào)控、自體移植物的免疫排斥和抗病毒等方面有著重要的作用。BoLA-A屬于BoLA-Ⅰ類的典型性抗原,但有關(guān)BoLA-A的研究較少。BoLA-A的基因頻率在不同品種間

3、存在著顯著地差異,而且部分品種中缺乏某些等位基因。BoLA-A對妊娠免疫的影響尚未見報道。雖然本實驗室對MICB和BoLA-NC1在妊娠奶牛和新生牛中的差異表達進行了研究,發(fā)現(xiàn)在奶牛的不同妊娠時期,其表達量存在著顯著差異,并認為其差異表達有利于妊娠和分娩,但其對妊娠免疫調(diào)節(jié)機理尚未可知。本研究采用熒光定量PCR檢測并分析BoLA-A在妊娠奶牛和仔牛中的差異表達,以求了解BoLA-A對奶牛妊娠和分娩的影響。
　　本實驗的樣品來自上海

4、奶牛研究所的荷斯坦奶牛。分別取孕初期、孕中期、臨產(chǎn)母牛的外周血液樣本和新生仔牛的耳組織樣本以及胎盤的組織樣本,進行RNA的提取并反轉(zhuǎn)錄成cDNA;通過實時熒光定量PCR檢測BoLA-A在妊娠奶牛和仔牛中表達量。
　　實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),BoLA-A在奶牛妊娠中期的表達量明顯高于妊娠早期和分娩前期(p<0.01)、在分娩前期和妊娠早期的表達量無顯著差異(p>0.05),而在新生仔牛則顯著升高(p<0.01),在后備奶牛和胎盤中幾乎檢測不到

5、(p<0.001)。結(jié)果推斷,奶牛BoLA-A在奶牛的妊娠、分娩以及新生仔牛中的差異表達是受到母體免疫機制調(diào)節(jié)的。在妊娠早期,由于妊娠過程的建立,BoLA-A的表達量受到胎兒對于母體免疫反應(yīng)激動的影響而低表達；而BoLA-A在妊娠中期的高表達,則表明隨著胎兒對母體的適應(yīng)過程,其相互之間的排異逐漸降低。在分娩前BoLA-A的低表達,可能是胎兒與母體之間為分娩而形成的強烈排斥反應(yīng)。在新生胎兒的超高表達和后備牛中的幾乎零表達則進一步證實了以上