miR-184在堿燒傷角膜新生血管中的表達和功能研究.pdf

1、目的:探討miR-184在堿燒傷誘導角膜新生血管形成過程中的表達變化和作用機制，及其對體外血管新生的影響。
　　方法:堿燒傷誘導大鼠角膜新生血管形成，基質(zhì)膠上建立人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞體外三維培養(yǎng)體系，應用實時熒光定量PCR方法檢測miR-184的體內(nèi)外表達。生物信息學方法預測并分析miR-184靶基因。體外培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞，脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染miR-184 mimic進入細胞中，應用MTT、Transwell檢測方法分別觀察轉(zhuǎn)染

2、后血管內(nèi)皮細胞增殖和遷移能力的變化，同時觀察miR-184對基質(zhì)膠上細胞體外管腔形成能力的影響。
　　結(jié)果:初步建立起血管新生的體內(nèi)外研究模型，miR-184在堿燒傷大鼠角膜新生血管角膜中的表達(0.145±0.013)較正常角膜(1.015±0.189)顯著下降(P＜0.01)，而在人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞中相對表達量極少(0.007±0.004)(P＜0.05)。預測的的靶基因與VEGF血管生成信號通路有關。miR-184 mim

3、ic有效轉(zhuǎn)染入人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞中，轉(zhuǎn)染后48h細胞光密度值(0.50±0.039)和轉(zhuǎn)染后24h細胞遷移過膜數(shù)(55.4±5.857)均較對照組明顯減少(P＜0.01)，形成管腔樣結(jié)構(gòu)分支點數(shù)(13.33±2.082)較對照組明顯減少(P＜0.05)。
　　結(jié)論:新生血管進程中伴隨著miR-184表達量降低，miR-184能抑制細胞的生長和無血清誘導的遷移能力，減弱內(nèi)皮細胞基質(zhì)膠上體外管腔形成能力，可能通過VEGF血管生成信號