STC-1在新生奶牛胃腸道中的定位和定量表達(dá).pdf

1、Stanniocalcin-1(STC-1)是一種重要的Ca2+調(diào)控類糖蛋白激素，由硬骨魚類所特有的斯坦氏小體分泌到血清中，后來陸續(xù)在多種動物和人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了這種蛋白。STC-1參與鈣磷代謝，它能抑制鈣離子的吸收和促進(jìn)磷離子的吸收及重吸收，維持血清中正常鈣離子濃度，并進(jìn)一步抑制磷酸鹽的排泄。雖然STC-1廣泛表達(dá)于哺乳動物中，但是其機(jī)理仍不清楚。從組織水平和分子層面上進(jìn)一步研究STC-1在奶牛體內(nèi)的表達(dá)和分布，對研究奶牛鈣磷代謝具有重要意

2、義，同時也為防制奶牛的鈣磷代謝紊亂疾病提供新的路徑。
　　 關(guān)于STC-1在奶牛中的研究多集中于奶牛妊娠期和哺乳期卵巢、血液和腎臟中STC-1的表達(dá)和功能，而STC-1在奶牛胃腸道中的表達(dá)研究不多，至今未見相關(guān)文獻(xiàn)報道。STC-1是調(diào)節(jié)鈣磷代謝的重要因子，在腎臟中具有調(diào)節(jié)鈣磷排泄和重吸收的作用。初生奶牛是奶牛新陳代謝和生長最旺盛的時期，也是鈣和磷的吸收和骨骼發(fā)育的重要時期。本論文旨在于研究STC-1在初生奶牛胃腸道中的分布規(guī)律，

3、為進(jìn)一步研究STC-1在消化系統(tǒng)中的鈣磷吸收作用提供實驗依據(jù)。
　　 本實驗選取1日齡新生荷斯坦奶牛，運(yùn)用原位雜交技術(shù)和免疫組化技術(shù)從基因水平和蛋白水平上，對STC-1基因和蛋白在奶牛胃腸道壁的分布進(jìn)行了研究。原位雜交的結(jié)果表明，瘤胃固有層中有點(diǎn)狀棕黃色反應(yīng);網(wǎng)胃的黏膜上皮邊緣、瓣胃黏膜上皮與固有層的交界處、皺胃胃小凹和胃底腺可見顆粒狀棕黃色染色;空腸黏膜上皮吸收細(xì)胞、腸腺以及回腸黏膜上皮細(xì)胞的雜交信號較弱;盲腸黏膜上皮和杯狀細(xì)

4、胞周圍有棕黃色反應(yīng);結(jié)腸黏膜上皮邊緣吸收細(xì)胞可見棕黃色染色。免疫組化的結(jié)果顯示瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃黏膜層中呈彌漫性黃色染色，染色靠近固有層逐漸變淺;皺胃黏膜上皮細(xì)胞、胃小凹和胃腺，空腸上皮吸收細(xì)胞、腸腺分泌細(xì)胞處可見有明顯的斑塊狀棕黃色染色;回腸黏膜上皮細(xì)胞邊緣、盲腸黏膜上皮細(xì)胞、腸腺以及結(jié)腸黏膜上皮吸收細(xì)胞中有明顯的棕黃色顆粒狀染色。ELISA結(jié)果顯示，STC-1在奶牛胃腸道中是以10-7pg級存在的，其中瓣胃中和回腸中STC-1蛋白含量

5、較高，占上清可溶蛋白的24.72×10-7％和23.53×10-7％;網(wǎng)胃中STC-1蛋白含量最低，為13.24×10-7％;其他胃腸道中STC-1蛋白含量差異不大。運(yùn)用熒光定量技術(shù)證實STC-1mRNA在奶牛胃腸道壁中廣泛存在，其中十二指腸和結(jié)腸中STC-1 mRNA的表達(dá)量相對較高，分別是腎臟STC-1 mRNA表達(dá)量的85％和78％;空腸、回腸、盲腸中STC-1 mRNA的表達(dá)量水平差距不大;在奶牛的四個胃中，瓣胃中STC-1 m