阿維鏈霉菌基因重組菌株的選育.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，國際上和國內(nèi)的消費(fèi)者對于化學(xué)農(nóng)藥造成的直接或間接的危害越來越重視。阿維菌素作為生物農(nóng)藥的一種，是迄今為止人類發(fā)現(xiàn)的最有效的殺螨殺蟲抗生素。
　　 阿維菌素的的發(fā)酵是一個好氧的生物過程。傳統(tǒng)工業(yè)的微生物發(fā)酵使用深層高密度的發(fā)酵罐，溶氧常常成為發(fā)酵產(chǎn)品產(chǎn)量的重要限制性因素。本研究通過將含有透明顫菌血紅蛋白基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到阿維鏈霉菌中，從而改善阿維鏈霉菌的供氧條件，促進(jìn)阿維鏈霉菌的生長以及提高阿維菌素的產(chǎn)量。<

2、br>　　 本文重點(diǎn)考察了影響阿維鏈霉菌原生質(zhì)體的制備和再生的因素。首先，通過對阿維鏈霉菌發(fā)酵過程中定點(diǎn)取樣，用菌體干重法測得了阿維鏈霉菌的生長曲線。以此確定原塵質(zhì)體制備的菌絲體最佳培養(yǎng)時間為60 h。在培養(yǎng)基中加入濃度為0.25 g/ml甘氨酸。溶菌酶的濃度為2％，在34℃恒溫條件下酶解30 min。在此條件下形成的原生質(zhì)體的量最大為6.4×108個/ml。采用雙層平板涂布法，將制備的原生質(zhì)體涂布于加有0.2％的MgCl2·6H2O