控制水稻開花基因OsEF1及其互作基因OsK4的功能研究.pdf

1、開花是植物生命周期中的一個重要過程,標(biāo)志著植株從這營養(yǎng)生長階段轉(zhuǎn)變到生殖生長階段。水稻作為一種典型短日照植物,是世界上最重要的糧食作物之一,而開花時間與作物產(chǎn)量有著密切的關(guān)系。隨著水稻基因組測序的完成,通過對多種水稻突變體的研究,一些與水稻開花時間有關(guān)的基因相繼被克隆并進(jìn)行功能分析,進(jìn)一步完善了水稻開花時間的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)及分子機(jī)制,為加快育種研究進(jìn)程提供了重要的理論指導(dǎo)。
　　本文研究的早花突變體材料osef1是從實(shí)驗(yàn)室建立的10萬份

2、水稻突變體庫中篩選得到,前期工作已經(jīng)通過側(cè)翼序列的擴(kuò)增和互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)等證明了該突變體是由于Tos17插入到OsEF1基因的3’UTR導(dǎo)致其失活而引起的;亞細(xì)胞定位顯示在細(xì)胞核中;通過酵母雙雜交分析篩選出了35個與OsEF1互作的蛋白,其中利用回復(fù)雜交確定了OSK4與OsEF1的相互作用;本研究是基于以上結(jié)論對OsEF1的功能進(jìn)行深入研究。
　　首先,在自然光照條件下,通過田間農(nóng)藝性狀調(diào)查發(fā)現(xiàn),突變體osef1開花時間比野生型早30天左

3、右,株高比野生型矮約17厘米。
　　其次,用OsEF1的多克隆抗體對osef1突變體中蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示Tos17插入到OsEF1基因的3’UTR導(dǎo)致蛋白表達(dá)水平下降。
　　第三,通過OsEF1光周期節(jié)律性實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)OsEF1的表達(dá)在長日照和短日照下呈現(xiàn)出相似的節(jié)律性,在黑夜積累,光照出現(xiàn)之前達(dá)到峰值。通過比較突變體和野生型中mRNA水平的變化進(jìn)一步分析了在長日照下OsEF1能夠影響Hd1及其下游成花素基因Hd3