雌激素受體在許氏平鲉繁殖周期中生理作用的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、許氏平鲉是我國黃渤海常見的經(jīng)濟魚類之一。本文以山東近海網(wǎng)箱養(yǎng)殖許氏平鲉為研究對象,運用組織學、內(nèi)分泌學方法以及分子生物學方法,對許氏平鲉卵巢發(fā)育、血漿性類固醇激素及其受體基因克隆、表達的周年變動等進行了系統(tǒng)的分析與研究,所得結(jié)果與結(jié)論如下:
   1.許氏平鲇卵巢發(fā)育周期變化的組織學研究
   許氏平鲉的卵巢呈長囊狀,左右兩瓣大小略微不同。卵巢前端各由一條較粗的含有明顯血管的卵巢系膜固定,后端于一較短生殖道處匯合,經(jīng)生殖

2、孔開口體外。
   許氏平鲉的卵巢發(fā)育可以劃分為7個期,卵母細胞的發(fā)育分為6個時相。9月份至11月份是許氏平鲉卵巢內(nèi)的初級卵母細胞逐漸步入大生長期的階段,卵母細胞內(nèi)開始有卵黃物質(zhì)的積累。此后至翌年4月中下旬,初級卵母細胞逐步完成卵黃物質(zhì)的積累過程達到成熟。5月份的許氏平鲉進入懷孕期。雌魚體內(nèi)的受精卵胚在體內(nèi)同步發(fā)育,至翌年5月底至6月上旬,發(fā)育完善的卵胚才孵化出膜,由母體一次性排出體外。
   2.許氏平鲉血漿性類固醇激

3、素水平的周年變化研究
   利用I125標記的放射免疫測定方法(RIA)檢測雌雄許氏平鲉血漿中睪酮(Testosterone,T)、雌二醇(Estradiol,E2)和孕酮(Progesterone,P)含量的周年變動水平,結(jié)果表明:雌雄許氏平鲉血漿E2和P含量的周年變動趨勢相似。雌性許氏平鲉E2和P的含量均在繁殖前期達到峰值,懷孕期后發(fā)生明顯(P<0.05)的下降;T含量則隨著卵巢的發(fā)育逐漸增加,至懷孕期達到頂峰。雄性許氏平鲉

4、血漿E2和P含量均在精子發(fā)生早期和退化吸收期發(fā)生了一次增長,推測兩種性類固醇激素可能對精子發(fā)生和精巢復發(fā)具有重要作用;雄魚血漿T含量在精子發(fā)生早期出現(xiàn)一次明顯的增長,說明T可以有效促進精子的發(fā)生。
   3.許氏平鲉雌激素受體(ERs)基因的克隆及其表達分析
   本實驗首次克隆得到許氏平鲉三種ERs基因。ERαcDNA全長共計2972bp,包含一個開放閱讀框,可以編碼624個氨基酸;ERβ1cDNA全長2451bp,包

5、含一個開放閱讀框,可以編碼561個氨基酸;ERβ2cDNA全長2338bp,包含一個開放閱讀框,可以編碼659個氨基酸。本文利用多種生物學軟件將許氏平鲉ERs與其他硬骨魚類及哺乳動物的ERs序列進行比較,發(fā)現(xiàn)了ERs的一些共有結(jié)構(gòu)特點,也發(fā)現(xiàn)了許氏平鲉ERs的一些特有特點。本實驗利用RT-PCR方法,檢測了雌雄許氏平鲉性腺、肝臟、脾臟、腎臟、腦、腸、鰓、心、胃、脂肪、盲囊、頭腎和肌肉共13種組織中ERs的表達情況。結(jié)果表明,許氏平鲉ER

6、α在雌魚各組織中較雄魚各組織中的表達廣泛,包括一些非生殖組織中都有表達,如腸、脂肪和頭腎。然而,僅在雄魚肝臟和精巢中檢測到了ERα的mRNA表達。許氏平鲉ERβ1在雌魚體內(nèi)的表達同樣比雄魚廣泛。ERβ1在雌魚性腺中的表達豐富度最高,除肌肉超出了ERβ1-mRNA的信號檢測極限外,其他組織中都有表達,但鰓中的表達最弱。雄魚中ERβ1在肝臟中表現(xiàn)出最豐富的表達,其次為精巢,腸、盲囊、頭腎和腎中也有ERβ1的表達,其他組織中未能檢測到ERβ1

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