版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)NCD-2菌株能有效的防治棉花黃萎病,明確其生防作用機(jī)理將有助于提高其生防效果。本研究對(duì)影響B(tài).subtilis NCD-2菌株遺傳轉(zhuǎn)化的因素進(jìn)行摸索并對(duì)其轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行優(yōu)化,建立了該菌株的高效電擊轉(zhuǎn)化體系。通過(guò)比較5個(gè)不同大小和攜帶不同來(lái)源復(fù)制子的質(zhì)粒對(duì)其轉(zhuǎn)化效率的影響,發(fā)現(xiàn)質(zhì)粒大小與NCD-2菌株的電擊轉(zhuǎn)化效率之間沒(méi)有明確的相關(guān)性;而攜帶來(lái)源于B.coagulans復(fù)制子的質(zhì)粒pNW3
2、3N時(shí),NCD-2菌株的電擊轉(zhuǎn)化效率最高,可以達(dá)到3.6x104cfu·μg-1DNA,說(shuō)明復(fù)制子來(lái)源是影響轉(zhuǎn)化效率的一個(gè)重要因素。采用pNW33N質(zhì)粒在不同電阻、電場(chǎng)強(qiáng)度及培養(yǎng)時(shí)間下的電擊轉(zhuǎn)化效率的研究結(jié)果表明,該菌株轉(zhuǎn)接到生長(zhǎng)培養(yǎng)基后,37℃、150 r·min-1培養(yǎng)3.5h,在電阻值200Ω、電場(chǎng)強(qiáng)度14.0kV·cm-1的條件下轉(zhuǎn)化效率最高,能夠達(dá)到6.1×104cfu·μg-1DNA。優(yōu)化后的轉(zhuǎn)化體系為順利開(kāi)展B.subti
3、lis NCD-2菌株的分子遺傳學(xué)研究奠定了基礎(chǔ)。
細(xì)菌的群體感應(yīng)系統(tǒng)(quorum sensing,QS)是細(xì)菌根據(jù)特定的信號(hào)分子濃度監(jiān)測(cè)環(huán)境變化,并調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)來(lái)適應(yīng)環(huán)境變化的一種現(xiàn)象。在枯草芽孢桿菌中,QS系統(tǒng)調(diào)控細(xì)菌生物膜的形成,抗生素的產(chǎn)成及芽孢的形成等性狀。QS系統(tǒng)包括4個(gè)基因,即comX、comQ、comP和comA,其中ComX為10氨基酸肽,經(jīng)ComQ修飾后分泌到胞外與膜上的組氨酸激酶ComP結(jié)合,
4、ComP自磷酸化并將磷酸轉(zhuǎn)移到ComA,磷酸化的ComA控制感受態(tài)形成等的一系列編碼因子的轉(zhuǎn)錄。
通過(guò)對(duì)B.subtilis NCD-2菌株進(jìn)行全基因組序列分析,從中定位并克隆了OS系統(tǒng)基因comX、comQ、comP和coma。利用同源重組技術(shù)對(duì)B.subtilis NCD-2菌株中的comQ基因進(jìn)行了定位突變,獲得comQ基因缺失突變體菌株M6。
提取B.subtilis NCD-2野生型菌株和突變體
5、菌株M6的脂肽提取物。平板拮抗測(cè)定結(jié)果表明突變體菌株M6的脂肽提取物對(duì)番茄灰霉病菌的抑菌效果顯著降低。將脂肽提取物通過(guò)基質(zhì)輔助激光解析質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)鑒定分析表明:突變體菌株M6較NCD-2野生型菌株脂肽類(lèi)物質(zhì)FengycinB的產(chǎn)生量顯著降低;M6比NCD-2多產(chǎn)生一種脂肽類(lèi)物質(zhì)IturinB。因此,推測(cè)comQ對(duì)FengycinB的產(chǎn)生具有正調(diào)控作用,對(duì)IturinB的產(chǎn)生具有負(fù)調(diào)控作用。質(zhì)譜測(cè)定同時(shí)發(fā)現(xiàn)在NCD-2
6、野生型菌株和突變體菌株M6脂肽提取物中均含有一類(lèi)分子量較大的未知物質(zhì),但其在NCD-2野生型菌株中的濃度顯著高于突變體菌株M6。說(shuō)明comQ基因?qū)τ谶@組物質(zhì)的產(chǎn)生有著重要影響。
對(duì)NCD-2野生型菌株和突變體菌株M6生物膜的形成進(jìn)行了定性檢測(cè)和定量檢測(cè),結(jié)果表明突變體菌株M6的生物膜形成能力明顯下降,推測(cè)群體感應(yīng)系統(tǒng)comQ基因?qū)ι锬さ男纬删哂姓{(diào)控作用。
本研究為深入了解群體感應(yīng)系統(tǒng)在NCD-2菌株生防
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 生防枯草芽胞桿菌NCD-2菌株豐產(chǎn)素合成和生物膜形成相關(guān)基因的功能分析.pdf
- 枯草芽孢桿菌啟動(dòng)子的克隆及功能分析.pdf
- 棉花黃萎菌拮抗枯草芽孢桿菌NCD-2抑菌物質(zhì)的分離及性質(zhì)分析.pdf
- 枯草芽孢桿菌Mrp系統(tǒng)基因的克隆與表達(dá)研究.pdf
- 30040.枯草芽孢桿菌ncd2解磷相關(guān)基因的克隆及抑菌物質(zhì)的分離鑒定
- 13795.枯草芽胞桿菌ncd2生物膜形成和芽胞形成相關(guān)基因的克隆及功能分析
- 產(chǎn)甲酸草酸桿菌細(xì)胞數(shù)群體感應(yīng)系統(tǒng)hdtS基因的克隆和功能分析.pdf
- 枯草芽孢桿菌
- 枯草芽孢桿菌中甲硫氨酸氨基肽酶基因的克隆與功能研究.pdf
- 枯草芽孢桿菌概況
- 枯草芽孢桿菌課件
- 棉花根系分泌物對(duì)枯草芽胞桿菌NCD-2菌株生物膜形成的影響.pdf
- 枯草芽孢桿菌染色體dna的提取
- 35834.枯草芽孢桿菌aiia基因的表達(dá)及功能研究
- 枯草芽孢桿菌植酸酶phyC基因的克隆及其表達(dá)研究.pdf
- 枯草芽孢桿菌基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建、分析和網(wǎng)絡(luò)分解.pdf
- 枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)活性物質(zhì)的分離和功能測(cè)定.pdf
- 枯草芽孢桿菌谷氨酰胺轉(zhuǎn)胺酶基因的克隆及表達(dá).pdf
- 解淀粉芽孢桿菌PEBA20群體感應(yīng)基因族的克隆及相關(guān)特性研究.pdf
- 枯草芽孢桿菌lipA基因表達(dá)元件的修飾.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論