甘蔗抗黑穗病性檢測SCAR標(biāo)記的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該研究的目的是建立可檢測甘蔗黑穗病的SCAR標(biāo)記.該文通過預(yù)備試驗,優(yōu)化了甘蔗RAPD反應(yīng)組份和反應(yīng)程序,建立了適于甘蔗的RAPD反應(yīng)條件.采用隨機引物PCR擴增,對雜交親本Ya71-374、Co1001及其部分雜交后代進行了RAPD分析,篩選到與抗、感特異的多態(tài)性片段各一條,片段大小分別約為700bp和800bp.采用T-MD 18克隆載體,對700bp片段進行克隆,通過PCR和酶切鑒定,篩選陽性重組克隆子用于測序.測序結(jié)果顯示該片段

2、的實際長度為702bp,根據(jù)其兩端的序列,設(shè)計了一對上、下游長度分別為23bp和22bp的引物,并對上述材料進行PCR檢測.結(jié)果顯示所有材料均擴增出一條702bp的條帶,但感病親本和病感個體中還擴增出一條長約400bp的多態(tài)性片段;初步研究還顯示一組用于常規(guī)抗性鑒定的標(biāo)準對照種也有類似的標(biāo)記結(jié)果,從而將RAPD標(biāo)記轉(zhuǎn)化為SCAR標(biāo)記,該SCAR標(biāo)記有望用于甘蔗抗、感黑穗病基因型的鑒定.其上、下游引物的序列如下:上游引物:5'TTCCCC

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