中國(guó)小麥條銹菌優(yōu)勢(shì)種群的AFLP分析及水源11-14SCAR標(biāo)記的建立.pdf

1、小麥條銹病是我國(guó)小麥生產(chǎn)上的重要病害之一。合理使用抗病品種是防治小麥條銹病的經(jīng)濟(jì)有效措施。然而，品種抗銹性喪失是抗病品種應(yīng)用中最突出的問(wèn)題，研究表明小麥條銹菌新小種的產(chǎn)生和發(fā)展是引致小麥品種抗銹性喪失的主要原因。因而，弄清近年來(lái)我國(guó)小麥條銹菌主要小種及流行菌系的分子遺傳關(guān)系以及監(jiān)測(cè)小麥條銹菌生理小種的類(lèi)型及小種組成的變化對(duì)于小麥條銹病的綜合防治及抗病品種的選育具有重要的實(shí)際意義。 來(lái)自陜西、甘肅、云南和山西等地近幾年的監(jiān)測(cè)結(jié)果表

2、明，從出現(xiàn)的頻率來(lái)看，條中32號(hào)仍是優(yōu)勢(shì)小種，但從變化趨勢(shì)來(lái)看，Hybrid46類(lèi)群出現(xiàn)的頻率逐年下降，水源11類(lèi)群呈逐年上升趨勢(shì)，因此，本研究利用AFLP技術(shù)對(duì)我國(guó)近年來(lái)小麥條銹菌主要流行菌系，特別是水源11類(lèi)群進(jìn)行了DNA指紋分析和毒性分析；并用RAPD技術(shù)對(duì)水源11類(lèi)群的8個(gè)致病類(lèi)型進(jìn)行了多態(tài)性分析，以尋找主要流行類(lèi)型的特異性分子標(biāo)記。具體研究結(jié)果如下： 1.利用篩選出的19對(duì)引物中的10對(duì)引物對(duì)小麥條銹菌的12個(gè)生理小種

3、或類(lèi)型進(jìn)行AFLP分析發(fā)現(xiàn)，不同引物的擴(kuò)增條帶數(shù)為23-61個(gè)，擴(kuò)增片段分子量主要集中在200bp-750bp之間：在10對(duì)引物擴(kuò)增得到的431個(gè)AFLP條帶中，62％表現(xiàn)出多態(tài)性。 2.利用AFLP技術(shù)對(duì)小麥條銹菌主要流行菌系特別是水源11類(lèi)群的DNA多態(tài)性進(jìn)行聚類(lèi)分析并與毒性分析比較后表明：小麥條銹菌流行菌系之間無(wú)論是毒性特征還是DNA指紋特征都存在豐富的遺傳變異，但二者是不相關(guān)的；水源11類(lèi)群的不同類(lèi)型之間并沒(méi)有很近的親緣

4、關(guān)系，它們?cè)谶z傳上不屬于同一個(gè)來(lái)源。 3.共選用了190條10堿基隨機(jī)引物進(jìn)行RAPD分析，發(fā)現(xiàn)其中94條引物可以得到穩(wěn)定清晰的擴(kuò)增圖譜。對(duì)中國(guó)小麥條銹菌水源11類(lèi)群的8個(gè)致病類(lèi)型進(jìn)行的RAPD分析顯示：各致病類(lèi)型間的遺傳變異豐富，但一些基因組區(qū)段仍具有一定的保守性。 4.本研究尋找到了水源11-14、水源11-4的特異性RAPD標(biāo)記。通過(guò)對(duì)水源11-14特異RAPD片段的回收、克隆和測(cè)序，設(shè)計(jì)了一對(duì)特異PCR引物，并轉(zhuǎn)