中國小麥條銹菌鑒別寄主尤皮Ⅱ號(hào)、阿夫抗條銹病基因定位及分子標(biāo)記.pdf

1、摘要小麥條銹病是一種世界性病害，中國是世界上最大的小麥條銹病流行區(qū)，條銹菌又是一個(gè)相對(duì)獨(dú)立的流行區(qū)系。由于小麥條銹菌尚未發(fā)現(xiàn)有性階段，利用寄主的抗病基因也就成為鑒定小種致病基因的唯一途徑。因此，明確中國小麥條銹菌鑒別寄主的抗條銹基因及其遺傳特點(diǎn)，是監(jiān)測(cè)小麥條銹菌生理小種動(dòng)向，進(jìn)行生理?；芯康幕A(chǔ)，并將我國小種鑒定和品種抗病性分析提高到基因分析水平，將基因分析工作納入國際軌道，為抗病育種和基因布局提供依據(jù)。尤皮11號(hào)、Hybrid46、

2、阿夫是重要的中國小麥條銹菌鑒別寄主，明確其抗條銹基因，并標(biāo)記、定位，具有重要的理論與實(shí)際意義。本研究采用常規(guī)雜交分析方法，明確了以中國小麥條銹菌鑒別寄主尤皮n號(hào)為抗性供體，以至今尚未發(fā)現(xiàn)有抗條銹基因的Taichung29為背景轉(zhuǎn)育而成的抗條銹近等基因系Taichung296尤皮11號(hào)對(duì)中國條銹菌系Su1的抗性由1對(duì)顯性基因控制。通過SSR標(biāo)記定位技術(shù)，選用位于2B4B染色體上的SSR引物，對(duì)近等基因系Taichung296尤皮11號(hào)及其

3、輪回親本Taichung29和基因供體尤皮11號(hào)的基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增和電泳分析，結(jié)果顯示，在99對(duì)SSR引物中有2對(duì)引物WMS501和WMC335在近等基因系和輪回親本間穩(wěn)定擴(kuò)增出了有多態(tài)性的DNA片段，在近等基因系中擴(kuò)增出的特異片段同時(shí)也出現(xiàn)在抗性供體親本尤皮11號(hào)中。遺傳連鎖性檢驗(yàn)表明，微衛(wèi)星標(biāo)記WMS501與目的基因連鎖，在抗、感親本中擴(kuò)增出多態(tài)性條帶為WMS501190bp和WMS501182bp，并證明該基因?yàn)閅rju

4、4。而所獲標(biāo)記WMC335與目的基因不連鎖。用Xgwm501檢測(cè)159株F代群體中抗、感單株，有I株發(fā)生交換，Mapmaker軟件計(jì)算WMS501標(biāo)記位點(diǎn)與目的基因的遺傳距離為1.2cM.LOD值74.54根據(jù)Ruder等(1998)微衛(wèi)星圖譜，確定抗條銹基因Yrju4位于2B染色體的長(zhǎng)臂上。尤皮11號(hào)是具有特別鑒別能力的中國小麥條銹菌鑒別寄主，建議將此基因按國際編號(hào)命名為Yr34。按照基因供體Hybrid46所含抗條銹基因Yr3bYr

5、46YrH46及其染色體定位，選用6A3B6B染色體上116對(duì)SSR引物，對(duì)其近等基因系Taichung296Hybrid46及其輪回親本Taichung29基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增和電泳分析。結(jié)果表明，有10對(duì)引物在近等基因系和輪回親本間有多態(tài)性。為進(jìn)一步標(biāo)記和定位該基因奠定了基礎(chǔ)。采用常規(guī)雜交分析方法，對(duì)銘賢169與阿夫雜交的FFzBC，代及其親本進(jìn)行抗性鑒定和統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表明，阿夫?qū)?E16菌系的抗性至少由1對(duì)顯性抗條銹基因控

6、制:通過單體分析將阿夫抗2E16菌系的1對(duì)顯性基因定位在3B染色體上，等位性分析表明該基因不同于目前的已知基因。關(guān)鍵詞:小麥條銹菌，鑒別寄主，抗性基因，單體分析，微衛(wèi)星標(biāo)記獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研

7、究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間:去腳辛三fig)口日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容.踩密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名時(shí)間:，戶印年‘月