甘蔗遺傳轉化中的pmi篩選標記及其安全性評價.pdf

1、本研究以pmi基因作為篩選標記基因，以甘露糖作為篩選劑，通過基因槍轟擊遺傳轉化甘蔗，并研究其對甘蔗糖代謝的影響，同時通過轉基因甘蔗的田間種植，評價其安全性。研究結果表明：在基因槍介導的甘蔗福農(nóng)95-1702遺傳轉化篩選體系中，pmi/甘露糖篩選體系的甘露糖與蔗糖的配比為7:3為最適合碳源配比，轉化效率達7.4％：經(jīng)過PCR、RT-PCR、Northern雜交等分子檢測證實pmi基因已整合到甘蔗基因組，并測得蛋白表達量；轉基因甘蔗葉片的的

2、糖代謝分析結果表明，轉基因甘蔗已糖激酶的酶活性在甘蔗不同生育期均表現(xiàn)顯著上升，丙酮酸激酶的酶活性均顯著下降，而蔗糖合成途徑的三個關鍵酶酶活性只在甘蔗的成熟期表現(xiàn)顯著的變化，說明pmi基因影響甘蔗糖代謝相關酶類的酶活性；而土壤微生物平板培養(yǎng)和土壤酶活性分析結果顯示，轉基因甘蔗對土壤環(huán)境包括土壤微生物總量和土壤的主要酶類不產(chǎn)生顯著的影響。綜合以上分析結果，認為pmi基因用于甘蔗的遺傳轉化是可行的、對環(huán)境是安全的，對甘蔗自身生長和糖代謝也沒有