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文檔簡介
1、中文摘要i———ii—i—一;—————————————————————I———————————————I———————————IIiiiiii中文摘要甜菜是我國糖料作物之一,在我國北方地區(qū)種植,在育種過程中,主要的目的是培育出高產、高糖、高品質的新品種甜菜。在甜菜的生產中病蟲害較多,從而影響到甜菜的質量和品質。為了使植物生長性狀得到改變,基因工程是最直接有效的手段。由于基因工程具有周期短,見效快等優(yōu)點,所以,基因工程在植物新品種選育中
2、是一條有效的途徑。由于建立甜菜植株再生體系比較困難,較低的遺傳轉化效率,具有較差的重復性。因此。甜菜植株再生體系及遺傳轉化體系的建立,轉化并培育出優(yōu)質、高立的甜菜新品種是許多研究者的目標,具有很大意義。本研究是通過RTPCR擴增技術,將甜菜的蔗糖磷酸合成酶(SeS)基因克隆出來,進行重組質粒的構建,將目的基因利用農桿菌介導法導入甜菜,轉化條件得到了優(yōu)化,建立了穩(wěn)定的甜菜葉柄遺傳轉化體系,獲得轉蔗糖磷酸合成酶基因的甜菜再生植株。主要研究結
3、果如下:】對SPS基因進行擴增利用RTPCR方法從甜菜嫩葉片總RNA中克隆出甜菜的SPS基因。進行測定序列,該序列與甜菜SPS基因編碼區(qū)的核苷酸序列其同源性可達100%。2構建植物表達載體利用pMDl8TVector克隆載體的介導,將SPS基因與質粒pBll21連接,構建了以CaMV35S為啟動予和Tnos為終止子的植物雙元表達載體,該載體含有選擇標記基因npttI。3農桿菌介導法優(yōu)化了甜菜葉柄遺傳轉化體系結果顯示:將生長到對數生長期的
4、農桿菌菌液重懸稀釋,確定了濃度OD600值為06;葉柄外植體經過48h的預培養(yǎng),確定侵染時間為5min;確定了共培養(yǎng)培養(yǎng)基中乙酰丁香酮的濃度為1001amol/L;確定了22。C~25。C共培養(yǎng)4d;經過頭孢霉素的抑菌,確定了200mg/L的Kan濃度的篩選。AbstractAbstractSugarBeetisoneofourcountrysugarcrops,mainlygrowinnorthChina,inthebreedingp
5、rocess,themainpurposeistOcultivatehighyield、highsugar、highqualityvarietiessugarbeetIntheproductionofsugarbeettherearemorediseasesandinsectpests,thusaffectingthequalityofthesugarbeetInordertOchangetheplantgrowthcharacter,
6、geneticengineeringisthemostefficientmeansBecausegeneticengineeringhastheadvantagesofcycleshort、quickresultsSogeneticengineeringisaneffectivewayinnewvarietiesofplantsDuetoestablishsugarbeetplantregenerationsystemmorediffi
7、cult,genetictransformationefficiencyislow,repeatabilityisbadtherefore,sugarbeetplantregenerationandgenetictransformationsystemisestablished,producedhighquality,highyieldofsugarbeetvaretiesisthegoalofmanyresearchers,witha
8、greatsignificanceThisresearchisthroughtheRTPCR,sugarbeetSPSgenehasbeencloned,constructedrestructuredplasmid,Using49robateriummediatedtransformationisgoingtopurposegenetoleadsugarbeet,convertingconditionsareoptimized,this
9、studyestablishedstabletransformationsystem,getofSPSgeneturnedsugarbeetofregenerativeplantsThemainresultsasfollows1SPSgeneamplificationUseofRTPCRfromsugarbeetleavespieceofRNAclonedbeetSPSgeneSequencedetermination,thegeneh
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