馬鈴薯PPase基因克隆及其遺傳轉化研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究采用.RT-PCR技術,從馬鈴薯栽培品種大西洋(Atlantic)葉片中克隆了PPase基因,分別構建了組成型啟動子CaMV 35S、塊莖特異表達啟動子CIPP和低溫誘導表達啟動子rd29A驅動的反義PPase基因植物表達載體,然后采用農(nóng)桿菌介導法轉化優(yōu)良馬鈴薯栽培品種,獲得了轉基因馬鈴薯。取得的主要研究結果如下: 1.從馬鈴薯栽培品種大西洋葉片中提取總RNA,用RT-PCR方法擴增到馬鈴薯無機焦磷酸酶(PPase)基因c

2、DNA,序列分析結果表明該eDNA全長673bp,開放閱讀框架636bp,編碼211個氨基酸。該PPase基因已在GenBank中登記,登記號為EF091820。Blast同源性比較和分析表明,該cDNA與已發(fā)表的PPase基因(GenBank accession Z36894)同源性為97.62%。 2.采用酶切和連接的方法,構建了強組成型啟動子CaMV 35S、塊莖特異性表達啟動子CIPP和低溫誘導表達啟動子rd29A驅動的

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