半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)細胞培養(yǎng)及細胞系建立研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩103頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、魚類細胞培養(yǎng)的研究始于20世紀60年代。1962年,Wolf和Quimby建立了世界上第一個魚類細胞系,即虹鱒魚生殖腺細胞系RTG-2。此后,魚類細胞系的建立及其相關(guān)研究進展迅速。迄今為止,不僅建立了280余株魚類細胞系,而且魚類培養(yǎng)細胞已成為一種重要的研究手段在病毒學、免疫學、魚類資源保護與遺傳育種、腫瘤學、環(huán)境毒理學、魚類生理學、內(nèi)分泌學等方面的理論及應(yīng)用研究中發(fā)揮作用。因此,對魚類細胞培養(yǎng)及其細胞系建立進行研究具有深遠意義。

2、>   半滑舌鰨經(jīng)濟價值高,自然資源量少,是我國新開發(fā)的重要海水養(yǎng)殖魚類。然而,近年來,隨著日益加劇的環(huán)境污染、養(yǎng)殖規(guī)模的擴大以及集約化程度的提高,半滑舌鰨病害導致的死亡事件時有發(fā)生,給半滑舌鰨養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。半滑舌鰨致病病原特性和免疫抗病基因功能的研究是從根本上解決病害的方法;同時,半滑舌鰨雌、雄個體差異非常大,并且屬ZW型性別決定體系,是開展性別分化研究的理想材料。細胞系作為一種體外培養(yǎng)系統(tǒng),因其成本低、試驗重復性好、

3、條件可精確控制的優(yōu)點而成為該魚種相關(guān)研究的重要工具。
   本論文選取雌性半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis)頭腎、心臟、卵巢組織開展了細胞培養(yǎng)及細胞系建立研究。半滑舌鰨頭腎細胞系(TSHKC)、心臟細胞系(TSHC)和卵巢細胞系(TSOC)的培養(yǎng)基為添加20%FBS,50mM2-Me,100 U/ml青霉素,100ug/ml鏈霉素,1m M丙酮酸鈉,10 ng/ml bFGF的MEM完全培養(yǎng)基,三種細胞的形

4、態(tài)均為成纖維樣。TSHKC、TSHC、TSOC細胞至今分別已傳代40余代,30余代,30代。實驗中開展了溫度對TSHKC細胞生長影響分析,結(jié)果表明TSHKC細胞能在15-30℃溫度范圍內(nèi)生長,細胞系的原代培養(yǎng)溫度是該細胞系最適宜的生長溫度,較高或較低的溫度對細胞生長均有抑制作用,其中較高溫度對細胞生長的影響最明顯。TSHKC、TSHC和TSOC的二倍體核型均為2n=42,且具有異型W染色體。用牙鲆淋巴囊腫(LCDV)分別感染細胞系TSH

5、KC、TSHC和TSOC細胞,觀察到細胞病變效應(yīng)(CPE),透射電鏡下分別在TSHKC、TSHC和TSOC細胞內(nèi)觀察到病毒顆粒。將GFP和GRP報告基因通過脂質(zhì)體介導的方法轉(zhuǎn)入TSHKC細胞中并成功獲得了表達;將GFP報告基因通過脂質(zhì)體介導的方法分別轉(zhuǎn)入TSHC和TSOC細胞中也成功獲得了表達。
   文中對雌性半滑舌鰨脾臟、肝臟組織的細胞離體培養(yǎng)進行了初步研究,描述了脾臟組織中淋巴細胞、成纖維樣細胞、上皮樣細胞的生長特性,對肝

6、臟細胞的離體培養(yǎng)進行了初步探索,為脾臟免疫細胞功能研究奠定基礎(chǔ)的同時,為今后脾臟、肝臟細胞系的建立提供了依據(jù)。其次,通過脂質(zhì)體介導的方法將GRP和GFP報告基因分別在脾臟和肝臟的細胞中得到表達,為利用脾臟、肝臟細胞進行外源基因轉(zhuǎn)染及功能研究提供了依據(jù)。
   綜上所述,文中通過不同的魚類細胞原代培養(yǎng)方法,建立了雌性半滑舌鰨頭腎細胞系、心臟細胞系和卵巢細胞系,并從病毒感染性和外源基因轉(zhuǎn)染性兩個方面對細胞系的應(yīng)用性進行研究,為今后在

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論