半滑舌鰨Cynoglossus semilaevis雌性化和三倍體的人工誘導(dǎo)研究.pdf

1、半滑舌鰨(Cynoglossus semilaevis )俗稱鰨米、牛舌頭，主要分布在我國黃渤海海域，是我國特有的重要名貴經(jīng)濟(jì)魚類。半滑舌鰨雌雄個(gè)體差異很大，雌性生長速度比雄性快2～3倍。因此，實(shí)現(xiàn)雌性單性化養(yǎng)殖，對(duì)于提高半滑舌鰨的養(yǎng)殖產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。近年，我國水產(chǎn)科學(xué)研究者對(duì)半滑舌鰨的生物學(xué)特征、人工繁育等方面進(jìn)行了大量研究，已經(jīng)突破了人工繁殖難關(guān)。但是，關(guān)于半滑舌鰨的全雌化誘導(dǎo)和三倍體人工誘導(dǎo)等研究，迄今未見報(bào)道。

2、>　　 本研究利用不同濃度的17β-雌二醇浸泡半滑舌鰨魚苗誘導(dǎo)性轉(zhuǎn)化，觀察了半滑舌鰨的性分化過程和激素對(duì)性分化的影響，分析了激素誘導(dǎo)對(duì)半滑舌鰨的性比、生長速度和成活率的影響。本研究還探索了利用雌核發(fā)育二倍體的最佳誘導(dǎo)參數(shù)誘導(dǎo)三倍體的方法，觀察了三倍體的胚胎發(fā)育特點(diǎn)，利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)了染色體加倍的有效性。各項(xiàng)試驗(yàn)均取得了良好的效果，為半滑舌鰨全雌化和三倍體誘導(dǎo)研究提供了重要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和有益經(jīng)驗(yàn)。本研究取得的各項(xiàng)結(jié)果均為國內(nèi)外首次報(bào)道。

3、
　　 本研究取得主要試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 ⑴半滑舌鰨屬于雌雄異體分化型魚類，卵巢分化比精巢早。卵巢分化的解剖學(xué)標(biāo)志主要是卵巢腔的形成，最早出現(xiàn)于孵化后65天；精巢分化的解剖學(xué)標(biāo)志主要是輸精管和精小葉的形成，出現(xiàn)于孵化后70天。性分化的細(xì)胞學(xué)標(biāo)志主要是性原細(xì)胞減數(shù)分裂。卵原細(xì)胞減數(shù)分裂開始于孵化后100天后；精原細(xì)胞減數(shù)分裂則開始于孵化后90天左右。
　　 ⑵在激素誘導(dǎo)性轉(zhuǎn)化研究中，1μg/L、3μg/L、10μ

4、g/L和30μg/L的17β-雌二醇處理組的雌性比率分別為74％、82％、88％和97％，與對(duì)照組（26％）相比，處理組的雌性比率顯著提高（P﹤0.01）；乙醇組的雌性比率為36％，與對(duì)照組相比差異不顯著（P﹥0.05）。由此結(jié)果可以看出，17β-雌二醇可促使半滑舌鰨卵巢分化，卻抑制精巢分化。激素處理組未發(fā)現(xiàn)雌雄間性及不育現(xiàn)象。雌二醇對(duì)半滑舌鰨的早期生長影響不大，與對(duì)照組相比沒有顯著差異（P﹥0.05）；雌二醇處理對(duì)半滑舌鰨的死亡率沒有

5、明顯影響（P﹥0.05）。
　　 (3) 對(duì)半滑舌鰨雌核發(fā)育冷休克處理?xiàng)l件地優(yōu)化結(jié)果表明：受精卵在正常孵化水溫22±0.5℃培養(yǎng)時(shí)，雌核發(fā)育的最佳條件是：受精后3min，用5±0.5℃的海水冷休克處理20min。參照誘導(dǎo)雌核發(fā)育二倍體的條件，用冷休克法誘導(dǎo)出半滑舌鰨三倍體，流式細(xì)胞儀檢測(cè)染色體加倍的有效性。
　　 (4) 對(duì)半滑舌鰨三倍體的胚胎發(fā)育觀察結(jié)果表明，普通二倍體胚胎發(fā)育最快，雌核發(fā)育二倍體次之，單倍體發(fā)育最慢，