合肥市寵物犬與犬糧攜帶沙門氏菌情況調(diào)查及耐藥性研究.pdf

1、沙門氏菌(Salmonella)是一種重要的人畜共患病原菌,廣泛地存在于人類、畜禽、寵物、各種食物等。寵物犬誤食被沙門氏菌污染的飼料后而引起感染,在與人類密切接觸的過程中,易將沙門氏菌傳染給人類。同時(shí),人類在喂食犬時(shí),也可以因直接接觸被污染的飼料而感染沙門氏菌,從而不斷擴(kuò)大沙門氏菌的傳播范圍。寵物犬和犬糧作為沙門氏菌的貯藏宿主,在沙門氏菌的散播及其對(duì)人類的影響方面扮演著重要的角色。
　　為了解合肥市寵物犬和犬糧攜帶沙門氏菌情況,分

2、離菌株的藥物敏感性和耐藥基因攜帶情況,及耐藥基因mRNA的表達(dá)水平,本研究采集746份寵物犬肛棉拭子和404份犬糧樣品,利用PCR與常規(guī)技術(shù)相結(jié)合的方法進(jìn)行沙門氏菌的分離鑒定,分別采用凝集實(shí)驗(yàn)和K-B紙片擴(kuò)散法確定分離菌株的血清型和耐藥表型,用PCR方法檢測(cè)耐藥基因,同時(shí)結(jié)合表型確證實(shí)驗(yàn)鑒定產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株;利用SYBRGreenI染料法建立flor基因和sul2基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR(Real Time PCR)

3、檢測(cè)方法,并用Real Time PCR方法分別對(duì)不同菌株flor基因和sul2基因的mRNA表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定和分析。
　　結(jié)果顯示,寵物犬犬肛棉拭子樣品中共分離沙門氏菌19株,陽(yáng)性率為2.55％(19/746),腸炎沙門氏菌為優(yōu)勢(shì)血清型;犬糧樣品中分離沙門氏菌10株,陽(yáng)性率為2.48%(10/404),德爾卑沙門氏菌為主要的優(yōu)勢(shì)血清型。在對(duì)20種抗生素的感受性試驗(yàn)中,29株沙門氏菌對(duì)阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林耐藥性最強(qiáng),而對(duì)頭孢

4、西丁和磷霉素最敏感。具有多重耐藥性的菌株占分離菌株的31.03%,多重耐藥譜為AMC-AMP-SXT-DOX。共檢測(cè)出16種耐藥基因,其中以strA-B基因的檢出率最高,檢出率為37.93%;其次是blaPSE基因,檢出率為34.48%。結(jié)合表型確證試驗(yàn),鑒定出6株產(chǎn)ESBLs菌株。成功建立了flor基因和sul2基因SYBRGreenI熒光定量PCR檢測(cè)方法,最低檢測(cè)限度分別為102copies/μL和103copies/μL。對(duì)氟苯