小麥TaBEIII基因的克隆及淀粉合成相關(guān)基因在籽粒發(fā)育期的表達(dá)分析.pdf

1、淀粉分支酶（Branching enzyme，BE）將α-1,4-葡聚糖直鏈供體切開(kāi)，再通過(guò)α-1，6-糖苷鍵將斷裂的部分重新連接起來(lái)，產(chǎn)生分支結(jié)構(gòu)。在高等植物中BE具有物種特異性，一般分為三種類(lèi)型:BEⅠ，BEⅡ和BEⅢ。本研究利用cDNA末端快速擴(kuò)增方法(Rapid-amplificationof cDNA ends,RACE)，首次克隆出小麥BEⅢ基因(命名為T(mén)aBEⅢ)的cDNA全長(zhǎng)，其長(zhǎng)度為3780bp，開(kāi)放閱讀框(Open

2、reading frame，ORF)為2748bp，編碼916個(gè)氨基酸。TargetP軟件預(yù)測(cè)結(jié)果表明，TaBEⅢ蛋白定位于質(zhì)體，5'端包含一個(gè)由93個(gè)氨基酸組成的前導(dǎo)序列，并含有BEⅢ蛋白的特征:四個(gè)高度保守區(qū)和一個(gè)（α/β）8桶狀區(qū)。
　　本研究在普通小麥中辨析出26個(gè)淀粉合成相關(guān)基因的cDNA序列，和一個(gè)負(fù)向調(diào)控淀粉合成相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子（Starch Regulatorl，TaRSR1），通過(guò)熒光定量PCR測(cè)定它們?cè)谛←溩蚜０l(fā)

3、育期間的轉(zhuǎn)錄水平，用以分析小麥籽粒淀粉合成的機(jī)制。根據(jù)這26個(gè)基因在小麥籽粒發(fā)育期間的的轉(zhuǎn)錄情況可分為三類(lèi):第一類(lèi)主要在籽粒發(fā)育早期表達(dá)，它們可能對(duì)早期籽粒胚乳細(xì)胞機(jī)械組織的構(gòu)建、淀粉粒最初的形成有重要作用;第二類(lèi)主要在籽粒發(fā)育的中期和后期高表達(dá)，這類(lèi)基因的表達(dá)譜與淀粉積累速率的趨勢(shì)十分相似，因此推測(cè)此類(lèi)基因在籽粒淀粉合成中發(fā)揮重要作用;第三類(lèi)在整個(gè)籽粒發(fā)育期表達(dá)量都很低，推測(cè)它們可能與籽粒內(nèi)的臨時(shí)淀粉合成有關(guān)。轉(zhuǎn)錄因子（TaRSR1）