雞白痢凝集抗原的研制與應(yīng)用.pdf

1、雞白痢是由雞白痢沙門氏菌引起的各日齡雞的傳染病，以急性敗血性經(jīng)過或以慢性隱性感染為特征。目前還沒有效果可靠的疫苗預(yù)防該病，國(guó)內(nèi)外通常使用雞白痢診斷抗原，開展雞白痢疫病凈化工作。我國(guó)目前使用的規(guī)程抗原是以標(biāo)準(zhǔn)血清控制抗原含菌濃度的方法進(jìn)行制備，導(dǎo)致不同批次抗原檢測(cè)效果不穩(wěn)定。基于以上問題，本研究對(duì)51株初分離的雞白痢沙門氏菌進(jìn)行菌落型的分類以及血清類型的測(cè)定，從中找出各初分離菌株菌落型與血清類型之間的內(nèi)在聯(lián)系，進(jìn)而篩選出抗原制備菌株。通過

2、實(shí)驗(yàn)研究確定了抗原最佳含菌濃度，并與規(guī)程抗原的檢測(cè)效果進(jìn)行了比較。最后，將研制的抗原進(jìn)行了臨床應(yīng)用。主要結(jié)論如下:
　　 1、雞白痢凝集抗原制備菌株的篩選
　　 對(duì)51株初分離的雞白痢沙門氏菌進(jìn)行菌落型的分類以及血清類型的測(cè)定，從中找出各初分離菌株菌落型與血清類型之間的內(nèi)在聯(lián)系，篩選出抗原制備菌株，并測(cè)試菌株在人工培養(yǎng)基上連續(xù)傳代后，菌落型與血清類型的變異率。試驗(yàn)結(jié)果表明，YBc，yBC和Ybc三種菌落型是初分離菌株的主

3、要菌落類型，以YBc和Ybc菌落型中的菌株所含的O∶123抗原因子最豐富，以yBC菌落型中的菌株所含的O∶122抗原因子最豐富，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，篩選出三株抗原制備菌株。對(duì)抗原制備菌株與同類型未經(jīng)選擇菌株的變異率測(cè)定結(jié)果表明，經(jīng)過篩選可以保持菌株的相對(duì)穩(wěn)定，降低變異率。
　　 2、雞白痢凝集抗原的標(biāo)化
　　 使用不同含菌濃度的染色抗原分別檢測(cè)人工感染雞與自然感染雞，并與不同稀釋度的雞白痢高免血清分別進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)試管凝集反應(yīng)與平板

4、凝集反應(yīng)，比較不同含菌濃度染色抗原對(duì)人工感染雞和自然感染雞的檢測(cè)效果，以及對(duì)不同稀釋度高免血清的檢測(cè)差異。試驗(yàn)結(jié)果表明，含菌濃度為200億/ml的染色抗原陽(yáng)性檢出率最高，達(dá)96.2％，與標(biāo)準(zhǔn)試管凝集反應(yīng)結(jié)果一致，且反應(yīng)速度較快，反應(yīng)圖像清晰，便于肉眼判別。對(duì)自然感染雞的陽(yáng)性檢出結(jié)果與病變觀察和細(xì)菌分離結(jié)果完全一致，且對(duì)陽(yáng)性血清的檢測(cè)范圍也較寬。根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果，我們選用的雞白痢凝集抗原含菌濃度為200億/ml。
　　 3、雞白痢

5、凝集抗原的實(shí)驗(yàn)性檢測(cè)與臨床應(yīng)用
　　 使用自行研制的抗原與規(guī)程抗原同時(shí)檢測(cè)不同日齡的人工感染雞，比較兩種抗原的陽(yáng)性檢出率。使用自制抗原對(duì)不同品種的自然感染雞進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算該抗原的特異性與敏感性，同時(shí)與瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了比較。并對(duì)某種雞場(chǎng)雞白痢的流行情況進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查。試驗(yàn)結(jié)果表明，在三批不同日齡的人工感染雞中，自制抗原的檢疫效果比目前規(guī)程抗原略有提高。對(duì)5個(gè)雞種的全血平板凝集試驗(yàn)結(jié)果表明，該染色抗原的敏感性為99.2％，特異