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文檔簡(jiǎn)介
1、本研究以山羊?qū)ρ蚨蝗醵疽呙缑庖叻磻?yīng)性為模型,研究基因雜合度對(duì)體液免疫應(yīng)答能力的影響,以此尋求烏骨山羊個(gè)體基因雜合度與體液免疫應(yīng)答能力的關(guān)系,并探尋山羊INHβA基因?qū)w液免疫應(yīng)答的遺傳效應(yīng),期望為今后山羊的抗病育種提供借鑒。
選取186只健康的烏骨山羊接種羊痘弱毒疫苗,采用山羊尾巴內(nèi)側(cè)皮內(nèi)接種,每只山羊接種0.5ml。使用羊痘抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒(試劑盒檢測(cè)范圍:3.5ng/L-120ng/L)測(cè)定免疫前和免疫后28天血清中
2、羊痘病毒抗體;提取所有樣本的全基因組DNA,選取PGR、GnRHR、FSHβ、LHβ、Mc1R、Agouti、INHβA、Myf5、AA-NAT、IGF-1、NPY-Y1R基因的13個(gè)SNP位點(diǎn),用PCR-SSCP和PCR-RFLP法對(duì)樣本進(jìn)行基因分型。以PGR、GnRHR、FSHβ、LHβ、Mc1R、Agouti、Myf5、AA-NAT、IGF-1、NPY-Y1R基因的12位點(diǎn)來(lái)計(jì)算每個(gè)個(gè)體的基因雜合度,分析比較羊痘抗體水平在各雜合度
3、水平間的差異和雜合度與抗體水平的相關(guān)性;并且分析INHβA各基因型間血清中羊痘病毒抗體濃度間的差異、基因的加性效應(yīng)和顯性效應(yīng)。
研究結(jié)果顯示免疫前和免疫后28天血清中羊痘病毒抗體濃度分別為16.54ng/L和28.27ng/L,后者顯著高于前者(p<0.01);以12個(gè)SNP位點(diǎn)中每個(gè)位點(diǎn)的基因分型與免疫前、免疫后28天血清中羊痘病毒抗體的濃度和免疫前后血清中抗體的增量均沒(méi)有顯著的差異。以這12個(gè)中性位點(diǎn)來(lái)計(jì)算的個(gè)體基因雜合度
4、,分析個(gè)體基因雜合度與血清中羊痘抗體增量的相關(guān)性。結(jié)果表明,免疫后28天羊痘抗體增量隨著雜合度的升高而降低,表現(xiàn)為弱的負(fù)相關(guān)(p>0.05)。在研究群體中,INHβA基因有3種基因型,分別為GG、GH和HH,免疫前和免疫后28天血清中羊痘病毒抗體濃度在這3種基因型間差異均不顯著(p>0.05);但在免疫后病毒抗體增量上,GG型>GH型>HH型,其中GG型比HH型高一倍,兩者差異極顯著(p<0.01)。表明INHβA基因?qū)ρ蚨徊《疽呙绶磻?yīng)
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