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文檔簡介
1、肝臟由肝細胞、膽管上皮細胞、星形細胞、庫普弗細胞、樹突狀細胞等多種細胞組成。正常生理條件下,庫普弗細胞處于靜止狀態(tài),當機體受病原體感染或物理、化學損傷后,庫普弗細胞被激活,表達、分泌多種細胞因子,呈遞抗原,還產(chǎn)生多種炎性介質(zhì),在機體防御、損傷及修復、維持肝的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中起重要作用。為在轉(zhuǎn)錄水平了解庫普弗細胞與肝再生的細胞免疫和體液免疫反應相關性,本文用門靜脈兩步灌流法分散細胞,用Percoll離心和免疫磁珠分選法分離再生肝的庫普弗細胞,
2、用大鼠2302.0全基因組芯片檢測了大鼠2/3肝切除和手術(shù)對照后恢復2、6、12、24、30、36、72、120、168h時再生肝的庫普弗細胞基因表達情況,用熒光實時定量PCR檢驗芯片分析結(jié)果的可靠性,用生物信息學和系統(tǒng)生物學等方法分析了肝再生相關基因在大鼠再生肝庫普弗細胞中的表達模式和作用,用熒光實時定量PCR檢驗肝臟中庫普弗細胞標志基因的表達情況,結(jié)果表明芯片結(jié)果與熒光實時定量PCR檢測結(jié)果基本一致,證明芯片檢測結(jié)果可靠。用系統(tǒng)生物
3、學方法分析基因的功能、相互作用及在肝再生中表達變化初步證實,參與細胞免疫反應的419個基因中有111個基因與肝再生相關,參與體液免疫反應的378個基因中有64個基因與肝再生相關。T細胞活化增殖和抗原消除多發(fā)生在肝再生起始(PH后2-6h)和終止(PH后72-168h)階段,且貫穿于整個肝再生過程中;抗原加工遞呈多發(fā)生在肝再生進展和終止階段,庫普弗細胞實時監(jiān)控和調(diào)節(jié)細胞免疫,保護肝再生順利進行??乖庸こ蔬f、免疫細胞激活和補體激活在肝再生
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