雞傳染性支氣管炎病毒廣西分離株的致病性研究和細(xì)胞因子實時熒光RT-PCR相對定量檢測方法的建立.pdf

1、分類號S墨曼：31UDC碩士學(xué)位論文雞傳染性支氣管炎病毒廣西分離株的致病性研究和細(xì)胞因子實時熒光RTPCR相對定量檢測方法的建立吳志金學(xué)科專業(yè)亟隨獸醫(yī)堂指導(dǎo)教師圭壬塾握論文答辯日期2Q!三二Q三二3Q學(xué)位授予日期——答辯委員會主席奎鏖然雞傳染性支氣管炎病毒廣西分離株的致病性研究和細(xì)胞因子實時熒光RTPCR相對定量檢測方法的建立摘要傳染性支氣管炎(infectiousbronchitis，IB)是由傳染性支氣管炎病毒(infectious

2、bronchitisvirus，IBV)引起的雞的一種高度接觸性的急性傳染病，給全球養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大損失。目前對IBV分子生物學(xué)方面的研究較多，有必要對地方分離株的致病性、組織嗜性及感染后病毒在雞體內(nèi)的動態(tài)變化進行研究。生產(chǎn)中廣泛使用的弱毒苗和滅活苗都無法完全控制IB，安全高效的新型疫苗成為當(dāng)前研究熱點，細(xì)胞因子作為重要的免疫調(diào)節(jié)物，其表達量常常被用于疫苗免疫效果的評價。課題首先建立了IBV的實時熒光定量PCR(qPCR)檢測方法。建立的

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R2=O993、擴增效率為1015％、溶解曲線單一整齊，特異性好；最低檢測濃度為727101copies／gL，靈敏度高；重復(fù)試驗的變異系數(shù)為O69％一251％，重復(fù)性好。其次，課題選擇近年的4個IBV廣西代表性分離株GXYLl1072(LX型)、GXGLl1079(LX型)、GXNNl201(HN08型)和GXNN09032(新型)，通過點眼、滴鼻(105TOCID50／02ml／羽)分別對健康非免疫雛雞各25羽攻毒，