雞傳染性支氣管炎病毒Sczy3株細(xì)胞適應(yīng)株的培育及其免疫效力的評(píng)價(jià).pdf

1、雞傳染性支氣管炎(infectious bronchitis，IB)是雞的一種急性高度接觸性呼吸道傳染病，由雞傳染性支氣管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)導(dǎo)致[1]。該病毒具有高度變異性，血清型眾多，且不同血清型之間僅有部分交叉反應(yīng)甚至不存在交叉反應(yīng)性。國(guó)內(nèi)外主要采用弱毒疫苗接種對(duì)IB進(jìn)行預(yù)防，但現(xiàn)有的傳統(tǒng)疫苗對(duì)目前流行毒株僅能提供部分免疫保護(hù)。因此，為制定有效的免疫程序和為雞群提供堅(jiān)實(shí)的保護(hù)，應(yīng)

2、選擇地方分離毒株或與流行毒株同一血清型毒株研制的疫苗。
　　Sczy3是本實(shí)驗(yàn)室于2009年分離的一株LX4型的IBV毒株，利用雞胚腎細(xì)胞(CEK)將其連續(xù)傳至100代(C100)以致弱，希望制備出一株IB弱毒疫苗的候選株。試驗(yàn)結(jié)果顯示:毒株在CEK細(xì)胞傳代過(guò)程中，毒株能夠高度適應(yīng)CEK細(xì)胞，并能出現(xiàn)合胞體、空斑等典型病變。此后，將C100代毒接種后非免疫雛雞群未見(jiàn)臨床發(fā)病癥狀，發(fā)病率和死亡率均為0％，這說(shuō)明Sczy3毒株在CEK

3、細(xì)胞連續(xù)傳至C100代時(shí)已充分致弱。通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，不同代次的病毒在CEK細(xì)胞中CEK內(nèi)增殖變化曲線呈單峰狀，接毒后12-36h時(shí)是病毒增殖的高峰期，并于36h病毒滴度達(dá)到最高，但從接毒后36h至72h內(nèi)病毒滴度則逐漸降低。在CEK細(xì)胞中大致傳10代，Sczy3即可適應(yīng)細(xì)胞，且病毒滴度逐漸升高，但在感染CEK細(xì)胞36h時(shí)，則呈現(xiàn)出早期代次的Sczy3病毒滴度要高于中、晚期代次的病毒滴度(病毒滴度:C20＞C50＞C90)。<

4、br>　　為評(píng)價(jià)Sczy3 C100對(duì)同源毒株及當(dāng)前流行毒株的免疫保護(hù)效力。采用Sczy3C100、4/91和H120商品化疫苗分別接種7日齡的非免疫雛雞，經(jīng)二免后2周分別用Sczy3 P3和SCTW分離株進(jìn)行攻毒，統(tǒng)計(jì)各試驗(yàn)組雞群抗體效價(jià)、攻毒后臨診癥狀、氣管和腎臟的帶毒情況等指標(biāo)。結(jié)果顯示:免疫組雞群免疫后抗體效價(jià)均為陽(yáng)性，Sczy3 C100對(duì)同源毒株可提供有效免疫保護(hù);而對(duì)不同基因型毒株SCTW可提供一定臨床保護(hù)，但雞群氣管和腎