根癌農(nóng)桿菌介導NPR1基因對諸葛菜和菘藍的遺傳轉化.pdf

1、諸葛菜是一種觀賞花卉，因其具有高含量的亞油酸和低含量芥酸，也是一種極為理想的新型油料植物資源;菘藍為重要中藥材植物，其葉片也可用作制造靛藍染料的工業(yè)原料，具有很大應用價值，但二者在栽培過程中易受到病原菌的危害導致植株及產(chǎn)量受損。本研究通過農(nóng)桿菌介導法將調節(jié)植物獲得性抗性的關鍵基因NPR1(Nonexpressor of Pathogenesis-related Genes1)基因轉入諸葛菜和菘藍，以增強二者的抗性。得到的主要研究結果如下

2、:
　　 1.組織再生培養(yǎng)過程中，通過對比子葉和下胚軸的分化再生率，發(fā)現(xiàn)諸葛菜下胚軸平均再生率遠高于子葉再生率，而菘藍子葉平均再生率高于下胚軸再生率，故后續(xù)試驗中選擇了諸葛菜下胚軸和菘藍子葉為外植體進行遺傳轉化。
　　 2.外植體在不同卡那霉素濃度梯度培養(yǎng)基上的分化試驗表明，諸葛菜以12mg/L為初次卡那篩選濃度，16mg/L為二次篩選濃度;菘藍以6mg/L為初次卡那篩選濃度，9mg/L為二次篩選濃度，可以有效進行轉化再

3、生苗的篩選。
　　 3.通過根癌農(nóng)桿菌EHA105為載體進行諸葛菜和菘藍的遺傳轉化試驗，以諸葛菜下胚軸為外植體置于激素含量為3mg/L6-BA，8mg/L TDZ，0.2mg/L NAA，2mg/L ZT的分化培養(yǎng)基上進行分化篩選;菘藍子葉為外植體置于激素含量為3mg/L6-BA，0.2mg/L NAA，2mg/L ZT的分化培養(yǎng)基上進行分化篩選，經(jīng)過卡那霉素的篩選作用，外植體分化出綠芽初步判定為轉化苗。
　　 4.經(jīng)P