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文檔簡介
1、抗寒是許多蔬菜和大田作物需要的一個(gè)重要農(nóng)藝性狀.該文實(shí)驗(yàn)從探討冷旱應(yīng)答啟動(dòng)子P-RD29A冷誘導(dǎo)活性及冷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子CBF3在常溫下和低溫下超表達(dá)時(shí)對轉(zhuǎn)基因植株表型及抗寒性的影響等三個(gè)方面考慮,構(gòu)建了相關(guān)抗寒基因的三個(gè)植物表達(dá)載體.通過將攜有RD29A-GUS-Tnos基因表達(dá)盒的載體pBIN<'+>-RD29A-GUS轉(zhuǎn)化黃瓜和小番茄外植體材料,檢測CUS基因的瞬間表達(dá)活性,初步探討了冷誘導(dǎo)啟動(dòng)子P-RD29A在這兩種作物中是否具有冷
2、誘導(dǎo)活性的問題.將植物表達(dá)載體pBIN<'+>-35S-CBF3對黃瓜和小番茄進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,建立了寅瓜高頻再生和遺傳轉(zhuǎn)化體系,獲得了一株轉(zhuǎn)基因黃瓜植株,并通過了植物基因組PCR檢測;獲得了兩個(gè)具有Kan抗性的小番茄再生綠芽.主要研究結(jié)果如下:1冷誘導(dǎo)基因RD29A啟動(dòng)子片段P-RD29A的克隆、序列測定及分析;2轉(zhuǎn)錄因子、CBF3基因的克隆、序列測定和分析;3植物表達(dá)載體的構(gòu)建;4冷誘導(dǎo)啟動(dòng)子P-RD29A在黃瓜和小番茄中的冷誘導(dǎo)表達(dá)特
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