番茄THM27基因的克隆、表達載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、植物MYB轉(zhuǎn)錄因子是一類調(diào)控類黃酮生物合成多種酶表達的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控基因的表達,是植物對其生長發(fā)育及生理代謝調(diào)控的一種重要方式。以含有保守的MYB結(jié)構(gòu)域為共同特征,是最大的植物轉(zhuǎn)錄因子基因家族之一,廣泛參與植物發(fā)育和代謝的調(diào)節(jié)。番茄是重要的蔬菜類作物,同時也是類黃酮的重要來源,為改良番茄的品質(zhì),提高番茄果實類黃酮含量,進行MYB轉(zhuǎn)錄因子的研究是非常必要的。
　　 FHM27基因作為MYB轉(zhuǎn)錄因子的一種,具有MYB

2、功能轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能,能夠調(diào)控類黃酮的生物合成。通過重疊PCR技術(shù)可以有效的在體外進行基因重組,并且不需要內(nèi)切酶消化和連接酶的處理,操作簡單,依靠此技術(shù)可以快速實現(xiàn)目的基因和啟動子以及終止子的融合,改造表達載體。本研究以番茄為研究材料,通過巢氏PCR成功從番茄中克隆了MYB轉(zhuǎn)錄因子家族成員之一THM27基因;從番茄基因組DNA中克隆出番茄果實特異型啟動子FQE2A11;并從pCAMBIA1302質(zhì)粒中擴增出CMV35S啟動子和NOS終止子序