2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁
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1、浙江理工大學(xué)碩士學(xué)位論文家蠶RPA43相關(guān)基因（BmRPA43N）的克隆表達(dá)及定位分析姓名：劉靚玨申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：盛清張耀洲20091201浙江理T大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractA43，allessentialsubunitofyeastRNApolymeraseI(polI)，isencodedbyRPA43，interactswitllRm3andisatypicalgeneraltransc

2、riptionfactorrequiredforrDNAtranscriptionwhichisinvolvedinrecruitingRNAPItothepolIpromoterDuringthisprocess，thepolIsubunitA43isamajordeterminationfortheformationandstabilizationofthepolIRm3complexIthastwodomains，Ntermina

3、lRNPdomain斛姆)受a43翼andCterminaloligonucleotide—binding(OB)domainAproteinonlycontainingtheNterminalRNPdomainnamedTWISTNB，wasdiscoveredinmammals，avianandamphibianPatientswiththedeletionsinthiscodinggeneofTWISTNBhavesignific

4、antlearningdifficulties，whichsuggestedthatsuchmutationsdefineanewmicrodelefionsyndromeAsyet，thisproteinWasnotreportedininsectsByscanningthecDNAlibraryofsilkwormpupaeconstructedbyourlaboratory，weidentifiedonecDNAsequence，

5、whichcontainsa630bpORFencoding209aminoacidresiduesBioinformaticsmethodswereappliedtoanalyzetheobtainedsequenceanditsinducedaillinoacidsequenceTheresultshowedthattheproteinencodedbythisgenehaslowsimilaritywiththerelatedpr

6、oteininotherspecies，butitcontainstheconserveddomainRNAP_I_Rpa43_NThereforethegenewasnamedBmRPA43』0BombyxmoriRPA43』、(GenBankaccessionnumberisGU288816)WeclonedtheORFfragementofBmRPA43一NintopET一28avectorThefusionproteinwase

7、xpressedsuccessfullyinEcolibyaddingIPTGforinductionandafterNi2affinitychromatography，theHis—BmRPA43一Nwashighlypurified。FPLCanalysisshowedthepurityofHisBrnRPA43一NWashigherthan90％；themolecularweightofthefusionproteinWasals

8、oconfirmedbymassspectrometry，whichmatchedthetheoreticalvalueverywellInordertopreparethepolyclonalantibodyofBmRPA43_N，weusedthispurifiedfusionproteintoimmunizeamaleNewZealandrabbitTheobtainedpolyclonalantibodyhadatiterlar

9、gerthan1“12800attheconcentrationof10蚓mL，andthespecificreactionresponsedverywelldetectedinWesternblottinganalysisItWasdetectedthatthelevelsoftranscfif)tionandexpressionhadgreatdifferencesinvariousdevelopmentalstagesofBomb

10、yxmoribyWesternblottingandRT—PCRmethods，butthedifferenceswerenotobviousinvarioustissuesfrom5thinstarofsilkwormlarvaThehighestlevelofexpressionisineggandblood，andthelowestisinmothandfatbody，respectivelyMeanwhile，thetechno

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