組成型表達線粒體小分子熱激蛋白基因?qū)Ψ芽估湫缘挠绊?pdf

1、對于許多植物來說,線粒體在抵抗逆境脅迫中起重要作用.已經(jīng)報道,線粒體是受低溫影響的主要細胞器<'[22]>.在線粒體中,通過氧化磷酸化作用進行能量轉(zhuǎn)換,為細胞的各項活動提供能量,線粒體是細胞的能量代謝中心,呼吸過程中產(chǎn)生的活性氧,能調(diào)節(jié)氧化還原電勢、細胞氧化還原信號及基因表達.線粒體小分子熱激蛋白是線粒體的主要熱脅迫產(chǎn)物,細胞外的研究表明線粒體sHSP具有分子伴侶的作用,且在煙草中組成型表達番茄線粒體sHSP能提高煙草的抗熱性.此外,番

2、茄線粒體sHSP能夠被冷誘導,已有實驗證明葉綠體sHSP、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)sHSP、細胞質(zhì)sHSP與細胞的耐冷性有關(guān),而線粒體sHSP是否也與植物的耐冷性有關(guān)還不清楚.該實驗利用利用基因工程方法,將線粒體sHSP基因定向克隆于帶有組成性表達啟動子CaMV35S的植物表達載體pROK H中,凍融法轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌LBA4404,利用葉圓盤法對番茄進行Ti質(zhì)粒介導的遺傳轉(zhuǎn)化.提取轉(zhuǎn)基因番茄基因組DNA,以NPTⅡ基因的一對引物對其進行PCR分析,初步表明線