23912.對(duì)小鼠sun蛋白(sun1、sun2)和kash蛋白(syne1、syne2)在骨骼肌細(xì)胞核錨定、大腦神經(jīng)細(xì)胞遷移、視網(wǎng)膜發(fā)育、以及dna損傷反應(yīng)中的功能研究

1、目錄目j素1摘要4Abstract6第一章前言。91幾種模式生物中的細(xì)胞核錨定和遷移研究102細(xì)胞核膜蛋白SUN蛋白和KASH蛋白143細(xì)胞核膜和人類健康l8第二章SUNl、SUN2蛋白在骨骼肌細(xì)胞核錨定中的功能2l一、摘要2l二、背景知識(shí)和選題意義2l1骨骼肌細(xì)胞核的定位2l2SUN蛋白和KASH蛋白細(xì)胞核錨定功能的研究背景233選題意義24三、實(shí)驗(yàn)材料與方法241Sun2基因敲除小鼠的建立和SunlSun2雙敲除小鼠的培育242NS

2、ESUNl轉(zhuǎn)基因小鼠的建立253RTPCR254引物列表255免疫熒光染色和顯微鏡分析25四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果261突觸下細(xì)胞核的錨定在Sunl敲除小鼠中被部分破壞262肌肉細(xì)胞核的定位在Sun2敲除小鼠中沒有受到影響273突觸下細(xì)胞核的錨定在Sunl／2雙敲除小鼠中被破壞一294非突觸下細(xì)胞核的定位在Sunl／2雙敲除小鼠中被破壞。3l5Sunl／2雙敲除破壞SyneI，而不破壞LaminA／C在細(xì)胞核膜上的定位33五、d、結(jié)35第三章KAS

3、H蛋白Syne1、Syne2和SUN蛋白SUNI、SUN2在大腦神經(jīng)細(xì)胞遷移中的功能37一、摘要。37二、背景知識(shí)和選題意義371大腦神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)生與遷移372SUN蛋白和KASH蛋白細(xì)胞核遷移功能的研究背景4l3SUNl、SUN2和SyneI、Syne2在小鼠人腦發(fā)育中的ii期研究結(jié)果4l4熒光標(biāo)記大腦皮層中的神經(jīng)前體細(xì)胞可以觀察神經(jīng)細(xì)胞的遷移43三、實(shí)驗(yàn)材料和方法441表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建442小鼠胚胎子宮內(nèi)電轉(zhuǎn)和急性腦片培養(yǎng)及顯微攝影術(shù)

4、45四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果451SUNI／2DKO和Syne2KO小鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞矢向遷移失敗452SUNI／2和Syne2對(duì)于皮層神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞核轉(zhuǎn)位(nueleokinesis)以及細(xì)胞核中心體偶聯(lián)至關(guān)重要。4611小鼠飼養(yǎng)532組織分析和免疫熒光染色533BrdU標(biāo)記和流式細(xì)胞技術(shù)，一544小鼠視網(wǎng)膜電生理二545統(tǒng)計(jì)分析546免疫共沉淀和免疫印跡54四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果551Syne2KASH結(jié)構(gòu)域缺失導(dǎo)致視網(wǎng)膜外核層變薄以及細(xì)胞核定位異常552S

5、UNl和SUN2在視網(wǎng)膜ONL發(fā)育中的功能部分冗余593Syne2KO和SUNIKO小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞過度凋亡604INM在Syne2KO和SunlSun2DKO小鼠中受到影響625視桿細(xì)胞核在Syne2KO和SunlKO小鼠視網(wǎng)膜中遷移紊亂646視錐細(xì)胞核遷移在Syne2KO和SunlKO小鼠視網(wǎng)膜中異常657Syne2KO和SunlKO小鼠視網(wǎng)膜電生理缺陷688Syne2在視網(wǎng)膜中通過連接dynein、dynactin、kinesin介

6、導(dǎo)細(xì)胞核遷移69五、d、結(jié)7l1KASH蛋白和SUN蛋白在小鼠發(fā)育中的冗余和特異性7l2Syne2和SUNi／2在視網(wǎng)膜前體細(xì)胞INM和光感受細(xì)胞細(xì)胞核遷移中的作用723Syne2和SUNI／2通過連接dynein、dynactin、kinesin介導(dǎo)細(xì)胞核遷移72第五章SUNl、sL膩2在DNA損傷反應(yīng)中的功能74一、摘要74二、背景知識(shí)和選題意義741DNA損傷反應(yīng)機(jī)制742SUN蛋白在維持基因組穩(wěn)定中的潛在功能75三、實(shí)驗(yàn)材料和方