神經(jīng)細(xì)胞缺血性損傷原蛋白轉(zhuǎn)化酶1的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2012級碩士學(xué)位論文神經(jīng)細(xì)胞缺血性損傷原蛋白轉(zhuǎn)化酶1的研究Studyonexpressionofproproteinconvertase1afterneuralcellischemicinjury課題來源：廣東省自然科學(xué)基金($2012010009953)學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院粱正羽周東主任醫(yī)師外科學(xué)(神經(jīng)外科學(xué))專業(yè)學(xué)位碩士廣東省人民醫(yī)院答辯委員會主席柯以銓教授答辯委員會委員白小欣教授李方成教

2、授陸永建教授詹升全主任醫(yī)師2015年5月6日廣州摘要第一章小鼠局灶性腦缺血性損傷后原蛋白轉(zhuǎn)化酶1及神經(jīng)肽Y表達(dá)變化研究目的構(gòu)建小鼠局灶性腦缺血再灌注模型，研究PCI及神經(jīng)肽Y(neuropeptideY，NPY)在小鼠腦缺血皮質(zhì)中的表達(dá)及變化規(guī)律。方法構(gòu)建小鼠線栓法大腦中動脈阻塞模型，將小鼠隨機(jī)分為：假手術(shù)組、缺血再灌注4h組、24h組，用TTC染色方法評估造模成功與否，出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損的小鼠用于后續(xù)實驗。取小鼠腦組織制成冰凍切片，采用

3、免疫熒光方法檢測PCI蛋白表達(dá)。提取小鼠缺血側(cè)皮質(zhì)腦組織總RNA、總蛋白，采用實時熒光定量PCR及WesternBlot技術(shù)檢測PCI、NPYmRNA及蛋白在缺血再灌注各個時間點的表達(dá)量。結(jié)果1TTC染色結(jié)果顯示，假手術(shù)組、缺血再灌注4h組TTC染色未見梗塞灶，缺血再灌注24h梗塞體積約為262％。2免疫組化結(jié)果顯示：PCI主要表達(dá)于神經(jīng)元胞體及軸突，假手術(shù)組PCI陽性細(xì)胞數(shù)為226611928％，缺血再灌注4h組為404642928％

4、，缺血再灌注24h組為328811944％，各組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F16707，P=0004，n=3)。與假手術(shù)組比較，缺血再灌注4h組、缺血再灌注24h組PCI陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多(尸0005)。3PCI蛋白表達(dá)水平變化假手術(shù)組PCI前體proPCI(pro—proproteinconvertase1，proPCI)相對表達(dá)量為O112_0010，缺血再灌注4h組為O3560074，缺血再灌注24h組為02280048；各組pr