基因重組NRG-1β對缺血性腦損傷的神經(jīng)保護作用評價.pdf

1、目的：
　　 觀察神經(jīng)調(diào)節(jié)素-1β（Neuregulin-1β，NRG-1β）對大鼠大腦中動脈缺血（MCAO）性損傷的預防和治療作用，探討MCAO的病理生理學機制及NRG-1β治療的最佳時機和神經(jīng)保護作用。
　　 方法：
　　 成年健康Wistar大鼠475只，隨機分為假手術(shù)組、對照組、預處理組、治療組。應用線栓法建立MCAO模型，經(jīng)左頸外-頸內(nèi)動脈單劑量注射NRG-1β干預治療。
　　 Longa法進行

2、神經(jīng)功能學評分，干濕重法測量腦組織含水量，氯化三苯基四氮唑（TTC）
　　 染色法測定腦梗塞體積，TUNEL法檢測細胞凋亡，免疫組化、免疫熒光雙標法、免疫印跡及RT-PCR等檢測AQP-4、Erg-1、STAT-3、GFAP、MMP-9、NSE、XIAP和Smac等蛋白及其mRNA表達水平的變化。
　　 結(jié)果：
　　 ①模型建立后，對照組大鼠均出現(xiàn)神經(jīng)功能缺失癥狀，腦組織含水量和腦梗塞體積增大，NRG-1β預處理

3、及治療能明顯改善大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀，減少腦組織含水量及腦梗死體積。
　　 ②缺血再灌注能誘導神經(jīng)細胞凋亡，減少抗凋亡蛋白XIAP的水平，增加凋亡蛋白Smac的表達；NRG-1β預處理能減少大鼠缺血腦組織細胞凋亡數(shù)，明顯增加抗凋亡蛋白、減少促凋亡蛋白的表達水平、均衡抗凋亡蛋白（XIAP）/促凋亡蛋白（Smac）的表達水平、促進某些及早基因（Erg-1）的表達、有效抑制腦損傷后炎癥反應的發(fā)生發(fā)展；與對照組相比存在顯著差別（P<0.

4、05）。
　　 ③缺血后24 h內(nèi)給NRG-1β干預均能減少大鼠缺血腦組織細胞凋亡數(shù)，抑制腦損傷后炎癥反應，尤其以缺血1 h 給藥效果最好。NRG-1β的神經(jīng)保護作用至少持續(xù)至給藥后24 h。
　　 ④隨著缺血時間的延長，對照組腦組織AQP-4、STAT-3、GFAP、MMP-9、NSE等蛋白的表達水平有不同程度的增加；NRG-1β治療在一定時間內(nèi)能增加AQP-4、STAT-3、GFAP和NSE的表達水平，減少MMP-9

5、 蛋白的表達量。
　　 結(jié)論：
　　 ①NRG-1β預處理能誘發(fā)機體產(chǎn)生缺血性耐受，有效保護缺血腦組織繼發(fā)性損傷。
　　 ②NRG-1β對大鼠腦缺血再灌注損傷有積極的保護作用，缺血24 h內(nèi)給藥均可減輕腦損傷程度，缺血1 h 給藥可能是其最佳治療時間窗，這種神經(jīng)保護作用至少持續(xù)至給藥后24 h。
　　 ③NRG-1β的神經(jīng)保護作用可能是通過激活某些及早基因、結(jié)合并活化其特異性受體、抑制凋亡途徑中的多個環(huán)節(jié)