20757.谷氨酸棒桿菌莽草酸途徑相關(guān)酶及其催化特性的研究

1、中國科學(xué)院研究生院博士學(xué)位論文谷氨酸棒桿菌莽草酸途徑相關(guān)酶及其催化特性的研究姓名：李攀攀申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：劉雙江201111谷氨酸棒桿菌莽草酸途徑相關(guān)酶及其催化特性的研究成酶。DS2098在一定程度上受到莽草酸途徑中間產(chǎn)物shikimate的抑制作用，但抑制程度比較低，不受Phe、Tyr和Trp的反饋抑制和反饋阻遏作用。在谷氨酸棒桿菌中，DS2098和CM0819之間通過范德華力、疏水作用以及氫鍵的作用，特異性結(jié)

2、合形成蛋白質(zhì)復(fù)合物。復(fù)合物形成后，可以提高DS的活性，對CM的活性沒有明顯影響。DS2098和CM0819之間相互作用的界面為DS2098中第212219位氨基酸殘基SPAGARYE、CM0819中C末端的5個氨基酸殘基RGKLG以及第6064位氨基酸殘基SGGTR，尤其是前兩個區(qū)域。CM0819存在時，chorismate和prephenate對DS2098存在協(xié)同抑制作用。通過抑制動力學(xué)的分析以及抑制系數(shù)的測定，證明prephena

3、te是DS2098CM0819復(fù)合物中DS2098的競爭性抑制劑，競爭底物PEP的結(jié)合位點。當(dāng)兩蛋白之間的相互作用界面被破壞后，prephenate失去了對DS酶活的抑制作用。DS2098中第387394位氨基酸殘基HFDKVIDE與肽鏈的折疊有關(guān)。該區(qū)段發(fā)生突變后，蛋白質(zhì)不能正確折疊，形成包涵體。Ile285、Glu287和Ar9288三個氨基酸殘基與酶的催化密切相關(guān)，發(fā)生突變后，DS2098失活?；騨c911560編碼的蛋白注釋為