蛹蟲草菌誘導柞蠶蛹產(chǎn)生抗菌物質(zhì)研究.pdf

1、　　昆蟲在經(jīng)致病性或非致病性微生物、化學物質(zhì)、物理方法或創(chuàng)傷等非特異性刺激誘導后，能產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，并且誘導源沒有專一性，誘導產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)有著廣譜的抗菌活性。本論文研究了蛹蟲草菌的培養(yǎng)，蛹蟲草的栽培，蛹蟲草菌誘導柞蠶蛹產(chǎn)生抗菌物質(zhì)的粗提取及其活性檢測、理化性質(zhì)及其殺菌機理等有關情況，以便為提純該種抗菌物質(zhì)作為新型藥物提供基礎。研究結果表明：固體培養(yǎng)的菌種呈白色絲狀，菌落以輻射狀向外衍生，培養(yǎng)后期菌落中心有桔黃色色斑，液體培養(yǎng)三天，孢子呈

2、快速生長情況，此為接種最佳時期。采用注射法將蛹蟲草菌種注射于柞蠶蛹體內(nèi)，栽培蛹蟲草所需的溫度為22-25℃，光線為散射光，在第一階段為避光培養(yǎng)，在第二階段為微弱的散射光，一天保持5-6小時，最后子實體形成時期，光照要達到12小時左右，需要大量水分，適量的空氣，整個生長周期為45天左右。用PBS緩沖液粗提蛹蟲草菌誘導的柞蠶蛹所產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)，粗提液用抑菌圈法和比濁法檢測抑菌活性：雌雄蛹粗提液對金黃色葡萄球菌有抑制作用，對大腸桿菌和枯草桿菌

3、無任何作用；雄蛹第2天產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，雌蛹比雄蛹推遲1天，雄蛹產(chǎn)生抗菌物質(zhì)抑菌直徑較雌蛹大，雌雄蛹產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)一直持續(xù)到蛹體死亡；殺菌動力學研究表明雌雄蛹粗提液抑殺金黃色葡萄球菌的時間為半小時。不同pH、凍融次數(shù)、溫度對柞蠶蛹粗提液理化性質(zhì)有一定影響：pH為6時抑菌直徑最大：凍融多次粗提液仍具有抗菌活性；粗提液80'0處理10分鐘失去抗菌活性。粗提液清除自由基的作用：對超氧陰離子自由基清除率在58.22％左右；對羥基自由基的清除作用很微