葡萄白腐病菌拮抗菌的篩選及其抗菌物質(zhì)研究.pdf

1、化學農(nóng)藥是目前真菌防治的主要方法，但由它引起環(huán)境的污染對人類健康已經(jīng)造成很大的潛在威脅。從土壤含有的大量有益微生物中可以尋找可用作生物肥料或生物農(nóng)藥的菌種。本試驗的主要目的是把具有良好拮抗效果的拮抗菌從土壤中分離并篩選出來。以牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基為分離用培養(yǎng)基，從所采集的土樣中分離篩選出59株對葡萄白腐病菌有抑制作用的拮抗菌。經(jīng)過多次篩選最終篩選出1株對多種植物病原菌有抑制作用的拮抗菌L26，革蘭氏染色為陽性。L26菌株的發(fā)酵液抗菌譜較廣

2、，幾乎能夠抑制所有的被測試的真菌，對葡萄白腐病菌、尖孢鐮刀菌，玉米小斑病菌等也有強烈的抑制作用，此外還能夠抑制黃曲霉、毛霉、黑曲霉等很多能使食品腐敗的細菌。
　　將枯草芽孢桿菌L26發(fā)酵溶液經(jīng)過飽和度80％的硫酸銨沉淀初步純化后，用Hiload sepharose Q陰離子交換層析經(jīng)階梯狀梯度洗脫得到了一個有抑菌活性組分?？咕V檢測顯示，該活性組分對多種植物病原菌都有很有的抑菌活性。然后用 Hitrap desaulting凝膠過

3、濾層析對樣品脫鹽，去除離子等小分子雜質(zhì)，再利用HiPrep Superdex75 HR柱子對活性組分進行純化，然后把活性組分收集，用高效液相對收集的組分進行分析結(jié)果為單一峰，說明純度較高。
　　抗菌活性物質(zhì)LA具有很好的熱和pH值穩(wěn)定性，木瓜蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶對其活性幾乎沒有影響。且對多種植物致病菌具有很好的拮抗性，具有廣譜抗菌譜，但不具有幾丁質(zhì)酶、淀粉酶、葡萄糖苷酶活性。
　　枯草芽胞桿菌L26是一種無毒、安全、無