水稻細(xì)胞-病原細(xì)菌互作中一氧化氮（NO）產(chǎn)生及其影響因素分析的研究.pdf

1、本文以水稻日本晴品種和非親和性病原菌辣椒細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌(Xcampestrispv.vesicatoria)Xv5為主要的實(shí)驗(yàn)材料。首先證明了在正常培養(yǎng)條件下水稻懸浮細(xì)胞和Xv5自身不產(chǎn)生一氧化氮(NO)，只有在水稻懸浮細(xì)胞和非親和性病原菌Xv5互作后才產(chǎn)生NO，在0-8h內(nèi)NO濃度變化曲線在2-4h間達(dá)到最高值時(shí)?！　∮袌?bào)道，植物體內(nèi)產(chǎn)生NO的酶主要是NOS(一氧化氮合酶)和NR(硝酸還原酶)。在水稻懸浮細(xì)胞接種Xv5的同時(shí)加入NO

2、S抑制劑L-NAA和CAM，結(jié)果表明加入抑制劑后，NO含量較空白對(duì)照有所降低?？梢酝茢啵谒緫腋〖?xì)胞內(nèi)合成NO的酶可能是NOS。同樣在水稻懸浮細(xì)胞接種Xv5的同時(shí)加入NR抑制劑NaN3(疊氮化鈉)，結(jié)果能完全抑制NO的產(chǎn)生，可以推斷，在水稻懸浮細(xì)胞內(nèi)合成NO的酶可能是NR。由以上兩個(gè)試驗(yàn)的結(jié)論可以看出，在水稻懸浮細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生NO是多途徑的?！　♀}(Ca2+)作為第二信使，參與植物體內(nèi)多種生理功能的調(diào)節(jié)，在水稻懸浮細(xì)胞接種Xv5的同時(shí)加

3、入鈣通道抑制劑LaCL3，結(jié)果表明加入鈣通道抑制劑LaCL3后，NO含量較空白對(duì)照有所降低，表明在NO的合成過(guò)程中有Ca2+的參與。對(duì)該處理?xiàng)l件下的水稻懸浮細(xì)胞進(jìn)行死亡率測(cè)定，結(jié)果表明死亡率有降低的趨勢(shì)，而且隨著LaCL3濃度的降低，細(xì)胞死亡率略有下降?！　⊥瑯釉谒緫腋〖?xì)胞接種Xv5的同時(shí)加入Ca2+螯合劑DETA，結(jié)果表明加入DETA后，NO含量較空白對(duì)照有所降低。對(duì)該處理?xiàng)l件下的水稻懸浮細(xì)胞進(jìn)行死亡率測(cè)定，表明高濃度的EDTA不

4、能降低細(xì)胞死亡率，但是低濃度的EDTA能降低細(xì)胞死亡率?？赡茉谒緫腋〖?xì)胞體內(nèi)NOS對(duì)Ca2+的依賴性較低?！　∩矬w自身有一套防御活性氧的清除系統(tǒng)，其中Asc和GSH是植物體內(nèi)主要的還原性物質(zhì)，在Xv5接種的同時(shí)分別加入Asc和GSH后水稻懸浮細(xì)胞有降低的趨勢(shì)，說(shuō)明還原性物可以降低由過(guò)敏反應(yīng)引起的細(xì)胞死亡。　　通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)證明了，水稻和不同的細(xì)菌在細(xì)胞水平進(jìn)行互作后，親和性病原菌JxoI，RS63不能誘導(dǎo)水稻產(chǎn)生NO和HR，但是水