一氧化氮光學(xué)生物傳感器的研制及其用于藥物體外釋放研究和對刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮藥物的考察.pdf

1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文一氧化氮光學(xué)生物傳感器的研制及其用于藥物體外釋放研究和對刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮藥物的考察姓名：代晶申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：藥物分析指導(dǎo)教師：呂太平20050501四川大學(xué)焉帕分新專業(yè)黝斂碩士研究生論文15rain，敏感度較高，硝酸根(N03‘)、亞硝酸根(N02一)和氧均不會對膜有干擾。在3xlff2mol／LHCI溶液中，NO在400pmol／I～3600J_nnol／L的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=09988)

2、，檢測限為609mol／L，日內(nèi)精密度RSD=13％，日間精密度為32％，低、中、高濃度回收率分別為10014％、10317％和9664％。為下一步實(shí)驗(yàn)打下良好的基礎(chǔ)。(二)用NO生物傳感器研究NO供體藥物體外釋放的方法本實(shí)驗(yàn)用第一部分建立的吸光型NO生物傳感器系統(tǒng)研究了NO供體藥物硝普鈉(SNP)外釋放NO的通路及機(jī)理。根據(jù)SNP釋放NO的三種機(jī)理所需要的體外環(huán)境，測定了在不同條件的生理鹽溶液中SNP釋放NO的結(jié)果，探討了釋放機(jī)理，發(fā)

3、現(xiàn)光照和巰基化合物是引起SNP體外釋放NO的主要因素。用該吸光型NO生物傳感器建立了酸化的生理液中NO的含量測定方法。結(jié)果表明，在酸化的生理液中，NO在4001anol／L～3600／mml／L的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=09992)，檢測限為40iamol／L，日內(nèi)精密度RSD=23％，日間精密度RSD=34％，低、中、高三種濃度的加樣回收率分別為9425％、961l％、9938％。干擾試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)L—Cys和LGSH雖然在中性的環(huán)境下

4、對CytC膜有干擾，但在酸性條件下沒有干擾。通過與經(jīng)典方法Cniess比色法比較，發(fā)現(xiàn)兩種方法測定結(jié)果無顯著性差異。該生物傳感器系統(tǒng)為NO供體藥物的體外釋放研究提供了一種較好的手段。(三)用NO生物傳感器考察了體外刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO的藥物的方法本部分實(shí)驗(yàn)建立了巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO的傳感器測定法，結(jié)果顯示在酸化的培養(yǎng)液中，NO在20O且mol／L～18009mol／L的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r—O9959)，檢測限為509mol／

5、L，日內(nèi)精密度RSD=35％，日間精密度RSD=79％。干擾試驗(yàn)顯示培養(yǎng)液中的成分及所考察的藥物對CytC膜均無干擾。本文以能使巨噬細(xì)胞合成NO增多的^r干擾素(IFNf)和脂多糖(LPS)為陽性對照，測定細(xì)胞培養(yǎng)液中NO含量，并對體外刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO的幾種藥物(硫酸海藻多糖、香菇多糖、甘露聚糖肽)的活性進(jìn)行考察，通過與Greiss法作對比，發(fā)現(xiàn)雖然體系中NO含量末達(dá)傳感器法定量下限，但兩種方法測定結(jié)果無顯著性差異，證明N0