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1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)胞因子對(duì)人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞與卵巢癌細(xì)胞系HO8910侵襲性影響的比較研究姓名:陳慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師:邢福祺陳士嶺20040501細(xì)胞因子對(duì)人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞與卵巢癌細(xì)胞系HO8910侵襲性影響的比較研究中文摘要目的在體外培養(yǎng)原代人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞及卵巢癌細(xì)胞系HO一8910細(xì)胞的基礎(chǔ)上,觀察4種外源性細(xì)胞因子對(duì)人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞及HO一8910細(xì)胞的效應(yīng),比較細(xì)胞因子對(duì)兩種細(xì)胞在基因表達(dá)水平、蛋
2、白表達(dá)水平以及細(xì)胞水平侵襲能力的影響。方法早孕絨毛組織取自(6~8周)自愿人工流產(chǎn)的健康早孕婦女,由南方醫(yī)院婦產(chǎn)科提供。采用絨毛組織貼塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng),并鑒定和純化原代早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞。培養(yǎng)卵巢癌細(xì)胞系HO8910細(xì)胞。分別以EGF、TNF一Ⅱ、IL1d、IL10刺激培養(yǎng)細(xì)胞48小時(shí),用RTPCR檢測(cè)各侵襲相關(guān)基因MMP一2、MMP9、MTAl、KAllmRNA的表達(dá),細(xì)胞ELISA法檢測(cè)蛋白MMP一2和CD44v6的
3、表達(dá),利用Matrigel膜侵入培養(yǎng)系統(tǒng),采用染色和顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法,對(duì)穿透Matrigel膜的細(xì)胞進(jìn)行定量分析,記錄各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的數(shù)據(jù),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,比較兩種細(xì)胞在體外侵襲性的異同。結(jié)果:1體外觀察到人早孕滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)MTAl和KAllmRNA,以及CD44v6。2EGF促進(jìn)兩種細(xì)胞MMP2、MMP一9mRNA的表達(dá),并呈濃度依賴(lài)性;TNF—d顯著提高兩種細(xì)胞MMP一2mRNA的表達(dá),僅對(duì)細(xì)胞系HO8910細(xì)胞的MMP9mRN
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