WWOX基因轉染對人卵巢癌細胞系HO8910生長作用影響的實驗研究.pdf

1、目的: 研究抑癌基因WWOX對人卵巢癌細胞系HO8910生長作用的影響，尋求卵巢癌基因治療的新途徑。 方法: 將攜有WWOX基因的真核表達載體體外轉染卵巢癌細胞系HO8910細胞(重組質粒組)，篩選穩(wěn)定轉染的細胞并擴增培養(yǎng)。用蛋白印跡法檢測WWOX蛋白的表達情況，并以轉染空載質粒(空質粒組)及未經轉染的HO8910細胞(空白對照組)作為對照。體外實驗：分別用四甲基偶氮唑藍比色法、體外侵襲實驗、瓊脂克隆形成實驗及流式細胞儀等分析W

2、WOX基因對HO8910細胞生物學活性的影響。體內實驗：將轉染細胞接種于BALB/c裸鼠腹腔，并觀察裸鼠生存時間和腫瘤生長情況。 結果: (1) 重組質粒組細胞中WWOX蛋白能穩(wěn)定表達，空質粒組及空白對照組細胞未檢測到WWOX蛋白的表達。 (2) 重組質粒組各時間點的細胞增值能力較空質粒組及空白對照組明顯下降，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 (3) 重組質粒組細胞的瓊脂克隆形成率(19.8％)明顯低

3、于空質粒組(54.5％)及空白對照組(56.0％)，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 (4) 流式細胞儀檢測顯示，重組質粒組中72.08％的細胞阻滯于G0/G1期，分別與空質粒組(41.02％)及空白對照組(39.31％)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 (5) 體外侵襲實驗顯示，重組質粒組穿膜細胞數為(89.7±3.1)個，分別與空質粒組[(91.2±1.3)個]及空白對照組[(91.4±1.3)個]比較，