VKORC1-1639A-G、CYP2C9基因多態(tài)性與瓣膜置換術(shù)后患者華法林用量關(guān)系的臨床研究.pdf

1、研究背景： 華法林是在人工機(jī)械瓣膜置換術(shù)后病人中常用的口服抗凝藥物，在達(dá)到同樣的抗凝效果的下，華法林其藥物劑量在不同個(gè)體間有近20倍的差距。因個(gè)體差異的因素導(dǎo)致因藥物引起的不良藥物反應(yīng)很多。 為了減少華法林抗凝治療并發(fā)癥，通過(guò)藥物基因組學(xué)的研究，對(duì)服藥個(gè)體的基因進(jìn)行分析，在口服藥物之前對(duì)藥物與個(gè)體進(jìn)行分析，明確藥物的功效，代謝過(guò)程，毒副作用，可以使個(gè)體與藥物的人-藥功效達(dá)到最佳的效果。 目前上述研究結(jié)果表明CYP

2、2C9酶作為華法林代謝酶，和VKOR酶作為華法林的功效酶的編碼基因CYP2C9和VKORC1-1639A/G基因多態(tài)性的因素可以部分解釋華法林口服劑量個(gè)體差異。 國(guó)內(nèi)尤其在中國(guó)西南地區(qū)上述兩種基因型的分布還無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。本課題通過(guò)對(duì)中國(guó)西南地區(qū)漢族人心臟機(jī)械瓣膜置換術(shù)后達(dá)到抗凝穩(wěn)定狀態(tài)后VKORC1-1639A/G及CYP2C9基因多態(tài)性的篩選，與患者口服華法林劑量、穩(wěn)態(tài)華法林血藥濃度的關(guān)系進(jìn)行分析探討中國(guó)西南地區(qū)人口CYP2C9

3、及VKORC1-1639A/G遺傳多態(tài)性等因素對(duì)華法林劑量的影響。 臨床資料和方法： 1.收集第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍心血管外科中心100例中國(guó)重慶地區(qū)心臟瓣膜置換手術(shù)后華法林治療達(dá)到抗凝穩(wěn)態(tài)的患者臨床資料，分析患者性別、年齡、病因、手術(shù)類型、手術(shù)方式、術(shù)后心律及CYP2C9及VKORC1-1639A/G遺傳多態(tài)性對(duì)抗凝穩(wěn)態(tài)患者口服華法林劑量的影響。 2.應(yīng)用HPLC法測(cè)定100名中國(guó)重慶地區(qū)心臟瓣膜置換手術(shù)后華

4、法林治療達(dá)到抗凝穩(wěn)態(tài)的患者血漿中華法林血藥濃度，并探討心臟瓣膜置換術(shù)后患者華法林血藥濃度與抗凝療效的關(guān)系。 3.應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)-限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)分析(RFLP)的方法，對(duì)上述患者CYP2C9及VKORC1-1639A/G遺傳多態(tài)性分布情況進(jìn)行分析，及上述基因多態(tài)性與抗凝穩(wěn)態(tài)患者華法林維持劑量及血藥濃度個(gè)體間差別的關(guān)系。 結(jié)果： 1.100例重慶地區(qū)漢族人工機(jī)械瓣膜置換術(shù)后抗凝穩(wěn)態(tài)病人中，患者口服華

5、法林維持劑量平均值為(2.68±1.04mg/d)；60歲以上(2.14+0.60mg/d)患者平均日劑量比60歲以下者低(p＜0.05)；術(shù)后房顫心律組比竇性心律組相華法林口服劑量多(p＜0.05)；不同性別p＞0.05)、不同手術(shù)方式p＞0.05)與華法林維持劑量無(wú)明顯不同。 2.通過(guò)HPLC法對(duì)術(shù)后抗凝治療病人血漿華法林血藥濃度的檢測(cè)，華法林血藥濃度平均值在(845.48±388.16ng/ml)。不同年齡、手術(shù)方式、性別

6、間的華法林血藥濃度無(wú)差別(p＞0.05)，房顫心律組與竇性心律組相比組間的血藥濃度無(wú)差異(p＞0.05)。 3.100例重慶地區(qū)漢族人工機(jī)械瓣膜置換術(shù)后抗凝穩(wěn)態(tài)病人中，VKORC1-1639A/G基因多態(tài)性共篩選到2種等位基因：VKORC1-1639A和VKORC1-1639G。VKORC1-1639A/G基因多態(tài)性共檢測(cè)到3種基因型，以VKORC1-1639AA基因型常見(jiàn)，共86例，占86％，其次為VKORC1-1639AG型

7、，共12例，占12％，VKORC1-1639A/G型共2例，占2％。在達(dá)到穩(wěn)定抗凝指標(biāo)后，VKORC1-1639AA組華法林平均劑量(n=86；2.41±0.75mg/d)，VKORC1-1639AG組華法林平均劑量(n=12；3.99+0.48mg/d)，VKORC1-1639GG組華法林平均劑量(n=2；6.56+0.44mg/d)間有差別(p＜0.01)，VKORC1-1639GG組華法林平均劑量比其他兩組華法林劑量高(p＜0.0

8、1)。 4.100例重慶地區(qū)漢族人工機(jī)械瓣膜置換術(shù)后抗凝治療病人，共篩選到2種等位基因CYP2C9*1與CYP2C9*3，未發(fā)現(xiàn)CYP2C9*2型等位基因。以CYP2C9*1/*1基因型常見(jiàn)，共95例，占95％，其次為CYP2C9*1/*1基因型，共5例，占5％。在達(dá)到穩(wěn)定抗凝指標(biāo)INR后，CYP2C9*1/*3雜合體組(n=5；1640.95±287.89ng/ml)血漿穩(wěn)態(tài)華法林濃度比CYP2C9*1/*1純合體組(n=95

9、；805.50±329.77ng/ml)明顯增高(p＜0.01)。 5.100例重慶地區(qū)漢族人工機(jī)械瓣膜置換術(shù)后抗凝治療病人中，基因型為VKORC1-1639AA/CYP2C9*1/*1型，共82例，其平均華法林平均劑量為(2.43±0.70mg/d)，平均血漿穩(wěn)態(tài)華法林濃度為(777.72±311.31ng/ml)；其次為VKORC1-1639AG/CYP2C9*1/*1型，共12例，其平均法林平均劑量為(4.10±0.48m

10、g/d)，平均血漿穩(wěn)態(tài)華法林濃度為(985.86±416.24ng/ml)；而VKORC1-1639AA/CYP2C9*1/*3型，4例，其平均華法林平均劑量為(1.61±0.66mg/d)，平均血漿穩(wěn)態(tài)華法林濃度為(1323.43±155.55ng/ml)；VKORC1-1639GG/CYP2C9*1/*1型及VKORC1-1639GG/CYP2C9*1/*3型分別僅有1例，其平均華法林平均劑量分別為(6.25±0.00mg/d)及(

11、6.88±0.00mg/d)，平均皿漿穩(wěn)態(tài)華法林濃度分別為(919.95±0.00ng/ml)及(2731.02±0.00ng/ml)，不同組間華法林口服劑量及血藥濃度有差別(p＜0.01)。 結(jié)論： 1.100例重慶地區(qū)漢族人工機(jī)械瓣膜置換術(shù)后抗凝穩(wěn)態(tài)病人中，患者口服華法林維持劑量平均值為(2.68±1.04mg/d)。60歲以上患者平均日維持劑量比60歲以下患者低；房顫心律組比竇性心律組需要較多的華法林維持劑量；華法

12、林劑量與性別、手術(shù)方式無(wú)相關(guān)。 2.VKORC1-1639A/G基因多態(tài)性的不同與中國(guó)重慶地區(qū)漢族人中華法林抗凝藥物劑量的個(gè)體間差異有關(guān)。華法林維持劑量在VKORC1-1639AA型患者(2.41±0.75mg/d)、VKORC1-1639AG型患者(3.99+0.48mg/d)及VKORC1-1639GG型患者(6.56±0.44mg/d)@呈遞增狀態(tài)，組間劑量相差很明顯。 3.CYP2C9基因多態(tài)性與抗凝穩(wěn)態(tài)華法林血

13、藥濃度的個(gè)體間差異性有很大的相關(guān)性。CYP2C9*1/*3型患者(1640.95±287.89ng/ml)穩(wěn)態(tài)華法林血藥濃度明顯高于CYP2C9*1/*1型患者(805.50±329.77ng/ml)。 4.對(duì)CYP2C9及VKORC1-1639A/G遺傳多態(tài)性同時(shí)篩選可以用于區(qū)分抗凝治療安全組(基因型為VKORC1-1639AA/CYP2C9*1/*1)和危險(xiǎn)組(基因型為VKORC1-1639AG/CYP2C9*1/*1，VK

14、ORC1-1639GG/CYP2C9*1/*3，VKORC1-1639AA/CYP2C9*1/*3及VKORC1-1639GG/CYP2C9*1/*1)患者，起到對(duì)華法林治療的預(yù)見(jiàn)性用藥，減少抗凝治療的誘導(dǎo)期及避免出現(xiàn)抗凝并發(fā)癥的作用。在收錄的病人資料中VKORC1-1639AA/CYP2C9*1/*3型患者需要較少的華法林維持劑量即可達(dá)到較高的血藥濃度，易出現(xiàn)出血并發(fā)癥，是屬于出血危險(xiǎn)組；VKORC1-1639AG/CYP2C9*1/