VEGF反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染對膽囊癌腫瘤血管生成影響的研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文VEGF反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染對膽囊癌腫瘤血管生成影響的研究姓名：李海軍申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師：彭淑牖20050110李海軍浙江大學(xué)博士學(xué)位論文達吣“1。VEGFmRNA在腫瘤細胞內(nèi)表達，內(nèi)皮細胞不表達VEGF，但腫瘤肉皮細胞過度表達F1t—lmRNA和KDRmRNA，說明VEGF主要是旁分拙。由于在原發(fā)性膽囊癌中的相關(guān)報道少，且結(jié)果并不一致，所以本文的第一部分就膽裳癌VEGF及其受體Flt1和

2、KDR表達情況以及與臨床病理特征的關(guān)系進行了研究。隨著分子生物學(xué)和遺傳工程的發(fā)展，基因治療得到廣泛的肯定，其中包括反叉核酸技術(shù)。早在1984年，Johnathan等就報道了用反義RNA抑制TK基因的表達取得了良好的效果【12】。反義寡核苷(anfisenseoligodeoxynucleotides，ASODN)是能與特定的DNA或RNA以堿基互補配對的方式結(jié)合，并阻止其轉(zhuǎn)錄和翻譯的短核酸片段，是目前迅速發(fā)展的新型的基因治療藥物[131

3、。陽離子脂質(zhì)體(cationicliposomes)自g&帶負電荷的核酸物質(zhì)形成復(fù)合物，可提高細胞對ASODN的攝人，增加生物利用度，同時可在一定程度上降低核酸酶對其的降解，在基因治療中具有獨特的應(yīng)用價值[1415]。oligofectamine是一種新型的專門用于寡核苷酸轉(zhuǎn)染的陽離子脂質(zhì)體，其效率高于市售的Lipofectamine[16171。目前國內(nèi)外尚未見VEGFASODN在膽囊癌方面的基因治療方面的報道，本文的第二、第三舌F分

4、就是利用oligofectamine介導(dǎo)的VEGFASODN轉(zhuǎn)染人膽囊癌細胞GBC—SD的體外和體內(nèi)研究，探討VEGFASODN對VEGF、Fit1和KDR在nkRNA和蛋白水平表達的影響，以及對腫瘤生長、增殖凋亡和血管生成的影響，以期為將來采用VEGFASODN對膽囊癌進行基因治療積累理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。參考文獻1CaoYH，0’ReillyMS，MarsnallB，eta1ExpressionofangiostatineDNAina

5、murinefibrosarcomasuppressesprimarytumorgrowthandproducelong—termdormancyofmetastasis[J]JClinInvest，1998，101：10552RiedelEGotteK，BerlerW：eta1Inversecorrelationofapoptoticandangiogenticmarksinsquamouscelleareinomaofthehead

6、andneck[J]0ncolRep，2001，8(3)：471—4763LukitsJ，TimarJ，JuhaszA，eta1ProgressiondifferencebetweencancersofthelarynxandhypopharynxisnotduetotumorsizeandVascularization[J]Otolarygol，2001，125(1)：18224RisauWWhat，ifanything，isanan