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文檔簡介
1、目的:探討三種蟾毒單體的抗肝癌作用和蟾毒靈誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡、逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的作用及機理。 方法:MTT、FCM檢測三種蟾毒單體對肝癌增殖和細(xì)胞周期的影響;FCM、TUNEL、瓊脂糖凝膠電泳、透射電鏡觀察蟾毒靈誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡,ICC、RT-PCR檢測Bcl-2、Bax表達,EMSA、Westernblot檢測NF-κB和p38MAPK活性;觀察蟾毒靈對裸鼠人肝癌原位移植模型的抗腫瘤作用;MTT檢測蟾毒靈逆轉(zhuǎn)人肝癌BEL-7402/
2、5-Fu細(xì)胞的多藥耐藥性,F(xiàn)CM檢測ADM、Rh-123、FLU在細(xì)胞內(nèi)的積聚,ICC檢測TS、P-gp、MRP1、Bcl-xL和Bax表達,F(xiàn)Q-PCR檢測Bcl-xL和BaxmRNA,F(xiàn)CM檢測線粒體膜電位(△Ψm)。 結(jié)果:蟾毒靈能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡并激活NF-κB、p38MAPK通路,逆轉(zhuǎn)肝癌多藥耐藥并下調(diào)TS和MRP1表達、改變Bcl-xL/Bax比值促進△Ψm耗散。 結(jié)論:蟾毒靈具有良好的抗肝癌作用并能誘導(dǎo)細(xì)胞
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