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1、[目的]:1.研究不同濃度氨茶堿對(duì)哮喘小鼠氣道樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)的分布、密度的影響.2.研究小劑量氨茶堿對(duì)粉塵螨誘導(dǎo)的哮喘小鼠氣道炎癥及樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)的作用.3.研究氨茶堿對(duì)人樹(shù)突狀細(xì)胞表面人類白細(xì)胞抗原-DR、CD83和CD80表達(dá)及白細(xì)胞介素-10分泌的影響,以進(jìn)一步探討小劑量氨茶堿治療哮喘的作用機(jī)制.[方法]:1.BALB/c小鼠50只隨機(jī)分為5組:①對(duì)照組,②哮喘組,③低劑量(20Mg/kg)氨茶堿治療組,④中劑量(30mg
2、/kg)氨茶堿治療組,⑤高劑量(40mg/kg)氨茶堿治療組.應(yīng)用透射電鏡及免疫組化間接法觀察DC形態(tài)并檢測(cè)小鼠氣道DC密度.2.BALB/c小鼠30只隨機(jī)分為對(duì)照組、哮喘組和氨茶堿(20mg/kg)治療組.以臨床常見(jiàn)變應(yīng)原粉塵螨建立哮喘小鼠模型,采用免疫組織化學(xué)間接法及計(jì)算機(jī)圖像分析方法比較各組小鼠氣道DC的分布及密度改變,并測(cè)定支氣管肺泡灌洗液(BALF)中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)計(jì)數(shù),并用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定BALF中IL-
3、5濃度.3.通過(guò)粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和腫瘤壞死因子α(TNF-α)體外共同培養(yǎng)體系,從人外周血單個(gè)核細(xì)胞中獲得DC,用流式細(xì)胞儀分析氨茶堿對(duì)DC細(xì)胞表面HLA-DR、CD83和CD80表達(dá)的影響,ELISA法測(cè)定IL-10濃度.[結(jié)論]:1.小劑量氨茶堿抑制嗜酸性粒細(xì)胞為主的氣道炎癥、下調(diào)氣道DC密度,但不影響DC有肺內(nèi)的分布.2.小劑量氨茶堿可能通過(guò)抑制DC表面HLA-DR表面分子的表達(dá)和白細(xì)胞介素-1
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